【摘 要】
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目的:了解半抗原二硝基氟苯(DNFB)结合乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)后对其抗体功能的影响.方法:常温下把HBIG(13mg/500μLPBS)水溶液分别与不同剂量(2、4、8mg)的DNFB混合,组成2
【机 构】
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金坛市人民医院内科,复旦大学化学系.上海市200433,复旦大学附属华东医院消化科
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目的:了解半抗原二硝基氟苯(DNFB)结合乙型肝炎免疫球蛋白(HBIG)后对其抗体功能的影响.方法:常温下把HBIG(13mg/500μLPBS)水溶液分别与不同剂量(2、4、8mg)的DNFB混合,组成2、4、8mg管,混匀过夜后离心.取2、4mg管及未加DNFB的HBIG水溶液对照管,各取半量对半稀释,以HiTrap分子筛柱脱盐,3个洗脱液再分别作对半系列稀释11次,3组共组成36个标本.ELISA法检测乙肝表面抗体的效价.取2、4mg管的另一半分别予饱和硫酸铵沉淀后取上清,以紫外光光度分析仪测定A340,与加入不同剂量DNFB的5个系列浓度作内标的对照管上清相比较,计算相应管中HBIG结合掉的DNFB量.结果:2、4mg管及对照组,经双因素方差分析及q检验,三组间同稀释度间吸光差值(A450-A630)无差异,而各稀释度间则有非常显著差异(P<0.01).饱和硫酸铵沉淀结合分光光度法测定证实2、4mg管中6.5mgHBIG分别结合DNFB0.67mg和0.86mg,即每一个HBIG分子分别结合88.72及113.48个DNFB半抗原分子,约占HBIG氨基酸残基的6.12%和7.86%.结论:免疫球蛋白(抗体)可作为半抗原DNFB免疫靶向治疗慢性病毒感染或肿瘤的一种有效载体.
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