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目的：探讨巯乙磺酸钠(mesna)对成熟铜绿假单胞菌生物膜(BF)的影响及其联合环丙沙星(CIP)对铜绿假单胞菌BF的作用。方法：微量稀释法检测mesna和CIP对铜绿假单胞菌PAO1的最低抑菌浓度(MIC)；建立铜绿假单胞菌BF体外模型后分为对照组、低浓度mesna组及高浓度mesna组,用激光共聚焦显微镜(CLSM)采集并结合BF图像结构分析软件(ISA)定量分析mesna对铜绿假单胞菌BF作用后的结构参数；铜绿假单胞菌BF再次分为mesna组、CIP组及CIP联合mesna组,用CLS M采集BF图像并结合Amira5.2三维重建软件定性分析mesna单独及联合CIP对成熟铜绿假单胞菌BF的作用；以棋盘设计,将不同浓度的mesna(0、0.5、1.0、2.0、4.0g·L-1)和不同浓度的CIP(浓度依次为(0、1/2、1、2、4和8MIC)两两组合,平板计数法检测mesna单独及与CIP联用后BF内活菌数。结果：mesna对PAO1的MIC为lOg·L-1，CIP对PAO1的MIC为0.125mg·L-1；CLSM图像经ISA软件定量分析显示，与对照组比较，mesna能使BF厚度、平均扩散距离和结构嫡均减少(P<0.O1)，区域孔率增加(P<0.O1)，高浓度组较低浓度组效应更明显(P<0.01)；CLSM图像经三维重建后可见，单用mesna(2g·L-1)，BF内细菌密集层叠，厚度较厚，可见大量活菌，未见明显死菌；单用CIP(2MIC)，BF内仍可见大量活菌，死菌数少；mesna(2g·L-1)联合CIP(2MIC)组可见BF细菌稀疏、厚度薄，活菌数少，BF内可见大量死菌；单用2g·L-1 mesna能使BF中的活菌数减少(P<0.05)，单用2MICCIP可使BF中活菌数降低(P<0.05)，1g·L-1 mesna与1MIC的CIP联合应用可使BF上的活菌数明显减少(P<0.05)。结论：mesna能破坏铜绿假单胞菌BF形态结构，mesna与CIP存在协同作用，可增强其杀菌能力。