【摘 要】
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目的:探讨短发夹RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)对乳腺癌移植瘤模型肿瘤生长的抑制作用及潜在的作用机制。方法:实时荧光定量PCR分析乳腺癌肿瘤组织和
【机 构】
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浙江萧山医院肿瘤内科; 杭州师范大学医学院; 哈尔滨医科大学公共卫生学院;
【基金项目】
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浙江省科技厅基金资助项目(编号:Z20130020)
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目的:探讨短发夹RNA(shRNA)干扰长链非编码RNA尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)对乳腺癌移植瘤模型肿瘤生长的抑制作用及潜在的作用机制。方法:实时荧光定量PCR分析乳腺癌肿瘤组织和细胞株中UCA1和miR-582-5p的表达;双荧光素酶报告实验检测UCA1与miR-582-5p的靶向关系;皮下注射乳腺癌细胞悬液构建乳腺癌移植瘤裸鼠模型;记录移植瘤模型裸鼠的存活率和肿瘤体积;TUNEL染色检测移植瘤组织中细胞凋亡情况;免疫组化检测移植瘤组织中Ki67、cleaved Caspase-3、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达。结果:在临床乳腺癌样本和乳腺癌细胞株中UCA1高表达,miR-582-5p低表达。TargetScan和miRcode预测UCA1与miR-582-5p有保守的结合区域;miR-582-5p mimic与UCA1野生型载体共转时荧光素酶的活性显著降低,而与UCA1突变型载体共转时,荧光素酶的活性没有明显变化。shRNA干扰UCA1后,移植瘤裸鼠的存活率显著升高;肿瘤体积显著减小,肿瘤质量显著减轻;移植瘤组织中凋亡细胞比率显著升高,且cleaved Caspase-3的表达显著升高;Ki67、MMP-2和MMP-9的表达水平均显著降低。结论:shRNA干扰长链非编码RNA UCA1抑制乳腺癌移植瘤模型肿瘤生长,其作用机制可能与UCA1靶向抑制miR-582-5p相关。
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