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研究将通过对骨性关节炎(OA)和RA患者的关节滑膜成纤维样细胞(FLS)进行正常氧和低氧培养后,观察FLS表达葡萄糖-6-磷酸异构酶(G6PI)和缺氧诱导因子(HIF)-1α的变化情况及对细胞周期的影响。
方法原代培养OA和RA患者的滑膜成纤维细胞,分别在正常氧和3%氧环境中培养24 h,实时荧光定量PCR检测G6PI、HIF-1α mRNA表达水平,蛋白印迹法检测G6PI、HIF-1α蛋白表达水平。流式细胞仪检测细胞周期。采用t检验、Mann-Whitney U检验进行统计学处理。
结果与正常氧培养相比,经3%氧培养RA FLS G6PI mRNA的升高倍数(2.6±0.4)明显高于OA FLS的升高倍数(1.5±0.4)(t=4.94,P<0.05);RA FLS G6PI蛋白表达水平明显高于OA FLS(t=2.81,P<0.05)。与正常氧培养相比,RA FLS经3%氧培养HIF-1α mRNA的升高倍数(2.9±0.8)明显高于OA FLS的升高倍数(1.4± 0.4)(t=4.51,P<0.05);RA FLS HIF-1α 蛋白表达水平明显高于OA FLS(t=14.54,P<0.05)。在3%氧低氧培养环境中,与正常氧培养相比,RAFLS G1期显著减少(t=11.31,P<0.05),S期(t=-7.62,P<0.05)、G2期显著增加(t=-9.95,P<0.05)。
结论在RA低氧环境中,G6PI、HIF-1α mRNA和蛋白水平在FLS中的表达增高,FLS细胞增殖加快。