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目的
研究壳聚糖对体外培养的尿毒症患者动静脉内瘘（AVF）血管平滑肌细胞（VSMC）增生的作用及其相关机制。
方法用组织块贴壁法体外培养尿毒症患者动静脉内瘘增生的VSMC和非尿毒症患者的血管VSMC，取其第二代进行实验，分为非尿毒症组（非尿毒症患者VSMC+完全培养基）、尿毒症组（尿毒症患者VSMC+完全培养基）、尿毒症+壳聚糖组（尿毒症患者VSMC+100 μg/ml壳聚糖）3组。应用免疫组化方法检测各组平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达，采用细胞划痕和Transwell方法分别检测VSMC体外迁移能力和侵袭能力，实时定量PCR检测各组细胞Toll样受体4 (TLR4）和增殖细胞核抗原（PCNA）的mRNA表达。用0、100、500 μg/ml不同浓度的壳聚糖对尿毒症患者内瘘VSMC进行干预，Western印迹检测各组细胞TLR4、MyD88和NF-κB蛋白的表达。
结果与非尿毒症组比较，尿毒症组、尿毒症+壳聚糖组细胞α-SMA表达均增加，VSMC体外迁移和侵袭能力增强，TLR4和PCNA的mRNA表达增加（均P <0.05）。与尿毒症组比较，尿毒症+壳聚糖组α-SMA表达下降，体外迁移和侵袭能力均减弱，TLR4和PCNA的mRNA表达减少（均P <0.05）。与0 μg/ml壳聚糖组比较，100、500 μg/ml壳聚糖干预尿毒症患者VSMC下TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达均下降，呈现浓度依赖性（均P<0.05）。
结论（1）壳聚糖可降低体外培养的尿毒症患者内瘘VSMC的迁移和侵袭能力；（2）壳聚糖可抑制体外培养的尿毒症患者内瘘VSMC的增殖，其机制可能与降低TLR4、MyD88、NF-κB的表达有关。