【摘 要】
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目的:探讨人红细胞（RBC）内核苷二磷酸激酶（NDPK）的酶学动力学特性。方法:利用NDPK催化反应底物二磷酸脱氧腺苷、三磷酸脱氧鸟苷生成三磷酸脱氧腺苷及二磷酸脱氧鸟苷（dADP+dGTP?dAT
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院药学部; 第三军医大学新桥医院内分泌科;
【基金项目】
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国家自然科学基金青年项目(编号:81503161);国家自然科学基金资助项目(编号:81273591);中央高校基本科研业务费专项资金资助(编号:2016YXZD050)
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目的:探讨人红细胞（RBC）内核苷二磷酸激酶（NDPK）的酶学动力学特性。方法:利用NDPK催化反应底物二磷酸脱氧腺苷、三磷酸脱氧鸟苷生成三磷酸脱氧腺苷及二磷酸脱氧鸟苷（dADP+dGTP?dATP+dGDP）的酶促反应,通过改变反应温度、热处理温度、pH条件、底物浓度及抑制剂浓度进行NDPK酶学动力学研究。结果:底物动力学研究中,Linewever-Burk双倒数图为两组平行直线。产物抑制动力学研究中,固定反应底物dGTP浓度并改变dADP浓度时,dATP表现为非竞争性抑制作用,固定反应底物dADP浓度并改变dGTP浓度时,dATP表现为竞争性抑制作用。反应遵循乒乓机制。文中实验条件下,NDPK酶促反应最大速度Vmax约为110μmol·min-1·g-1,KmdADP=1.26 mmol·L-1,KmdGTP=1.94 mmol·L-1。dATP抑制常数Ki约为0.340.67 mmol·L-1。结论:NDPK为酶促反应dADP+dGT dAPT+dGDP的一种高亲和性催化酶。
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