人血管抑素AK(1—3)基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

来源 :内蒙古大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hhh491371886
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用6月龄大月份流产的新鲜肝脏组织为材料,提取总RNA,通过反转录得到Cdna,并以此为模板,经PCR得到人Angiostatin基因的AK(1-3)片段.将此PCR产物直接与载体Pmd18-T连接,转化大肠杆菌DH5α.经蓝白菌落筛选,PCR和酶切检测,筛选出阳性克隆,命名为Pmda,测序证明克隆序列与GenBank发表序列一致,大小为858 bp.用SalⅠ和BglⅡ酶切将该基因插入载体Pqe40,并转化宿主菌M15[Prep4].经质粒电泳PCR和酶切检测筛选阳性克隆,得到表达载体Pqea,插入基因与
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