【摘 要】
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目的 观察临床剂量的电离辐射后小鼠神经元DNA双链的断裂及修复,探讨γ-H2AX是否能作为衡量体内正常脑组织神经元DNA双链断裂(DSB)形成和修复的指标.方法 电离辐射诱导DSB形
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤研究中心,Department of Radiation Oncology
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目的 观察临床剂量的电离辐射后小鼠神经元DNA双链的断裂及修复,探讨γ-H2AX是否能作为衡量体内正常脑组织神经元DNA双链断裂(DSB)形成和修复的指标.方法 电离辐射诱导DSB形成试验,C57BL/6小鼠行0.1、O.5和1.0 Gy全身照射后10 win,收集脑组织进行分析;DSB修复试验,修复功能正常小鼠(C57BL/6)和修复缺陷鼠(BALB/c,A-T和SCID)在全身照射2 Gy后0.5、2.5、5、24和48 h收集脑组织进行分析.未照射的小鼠作为对照组.γ-H2AX和NeuN免疫荧光双重染色和免疫组织化学染色分析脑组织神经元DSB形成和修复.结果 DSB形成试验,在对照组脑组织皮质区神经元的细胞核内仅有数目很少的γ-H2AX焦点,而受照射后细胞核内γ-H2AX焦点数目显著增加,并显示出明显的剂量相关.通过分析不同放射敏感性的小鼠电离辐射后脑组织皮质区神经元的DSB修复动力学,发现C57BL/6小鼠细胞核内γ-H2AX焦点随时间的延长迅速减少,在照射后24和48 h仅有很低水平DSB未修复;而免疫缺陷SCID鼠在照射后所有的时间点都显示出γ-H2AX焦点的明显增加,A-T小鼠表现出较低的修复缺陷.主要表现在较晚的时间点(≥5 h)γ-H2AX焦点的中度增加;放射敏感的BALB/c小鼠与C57BL/6小鼠相比γ-H2AX焦点数量轻度增加.结论 γ-H2AX焦点分析可以作为一项精确的量化指标,在体内衡量临床相关剂量电离辐射诱导的DSB形成和修复.
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