【摘 要】
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在谷氨酸棒状杆菌乙酸盐代谢调控关键酶-异柠檬酸裂解酶aceA基因两段启动子区域后面组装了无启动子的β-半乳糖苷酶报道基因,并且带上四环素抗性标记基因构建了两个检测质粒p
【机 构】
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浙江大学,Dept.Microbiol.and Biotech.
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在谷氨酸棒状杆菌乙酸盐代谢调控关键酶-异柠檬酸裂解酶aceA基因两段启动子区域后面组装了无启动子的β-半乳糖苷酶报道基因,并且带上四环素抗性标记基因构建了两个检测质粒pROH7 和pROHO.通过该两个质粒转化了谷氨酸棒状杆菌野生型菌株Corynebacterium glutamicum ACTT 14752,分别获得了含有两个检测质粒的两种谷氨酸棒状杆菌,由此建立了谷氨酸棒状杆菌在乙酸盐和葡萄糖基质上的两个蓝白生长筛选系统.结果显示当两种菌株生长在含有葡萄糖的基本培养基上时呈现白色菌落,而生长在含有乙酸盐的基本培养基上时呈现蓝色菌落;其中菌落颜色还随菌株中检测质粒pROH7 和pROHO的不同而呈现淡蓝色和深蓝色的变化.含有检测质粒pROH7 和pROHO菌落的颜色变化反映了细胞在葡萄糖和乙酸盐不同和碳源上的调控状态,该两个质粒在鉴定乙酸盐代谢中的调控变化方面是有积极意义.
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