【摘 要】
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目的克隆幽门螺杆菌(H.pylori)全长hpaA基因,构建表达HpaA蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,并研究其对小鼠的免疫保护作用.方法用PCR扩增全长hpaA基因,经适当的酶切-连接反应将
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目的克隆幽门螺杆菌(H.pylori)全长hpaA基因,构建表达HpaA蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,并研究其对小鼠的免疫保护作用.方法用PCR扩增全长hpaA基因,经适当的酶切-连接反应将其连入原核表达质粒pTrc99A,并进行了基因测序.重组质粒经鉴定后再导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261,提取重组菌质粒,PCR和酶切鉴定,筛选阳性克隆.用SDS-PAGE电泳和Western blot进行HpaA表达分析和鉴定,用薄层扫描分析HpaA含量.重组菌3×108CFU/0.4ml/只免疫C57BL
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