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摘 要：采用高效液相色谱法对注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠进行测定。本文当中所使用的方法具有非常好的线性关系，同时重复性非常好，精密度和其他的方法相比也有着非常大的优势，回收率高，所以在研究和测定的过程中也值得广泛的推广和应用。为我国医药行业的发展也创造了非常好的条件。
关键词：高效液相色谱法；头孢哌酮钠舒巴坦钠；测定
注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠是一种头孢菌素，它是光谱抗菌药中重要的一种，这种药物在生产、运输和贮藏的过程中可能产生一些杂质，主要有头孢哌酮杂质A和头孢哌酮其他的降解反应物，所以，为了更好的对药物当中的杂质进行有效的控制，本文采用了高效液相色谱法对两组分的含量以及相关物质的含量进行了测定，这一研究对了解相关物质的有效控制有着非常积极的作用。
1、方法
1.1高效液相色譜分析检测条件
色谱柱：Phenomenex CuroSil-PFP（5μm，250 mm × 4.6 mm i.d.）；流动相：5 mM 甲酸铵 - 乙腈（5：1，v/v），用甲酸调节 pH 至 4.0；流速：0.8 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：233 nm；进样量：5 μL。
1.2化学方法验证
我们将高效液相色谱的梯度色谱条件创建之后，需要开展验证实验，其中的项目主要有线性、检出限、测定限、重现性、精密度、稳定性和回收率等等。
1.2.1线性、检出限和定量限
精准的量取已经制备好的头孢哌酮钠、舒巴坦钠和头孢哌酮杂质A的标准品，同时将其配制成浓度范围为20—500μg/ml的溶液，分别采用高效液相色谱法来测定。不同浓度的液体应该重复检测三次，对色谱的峰面积进行准确的记录，通过平均的峰面积（Y）和对应的标准品浓度（X）之间存在的线性关系绘制出对应的标准曲线。
1.2.2重现性、精密度
重现性：准确的量取已经制备好的头孢哌酮钠、舒巴坦钠和头孢哌酮杂质A的混合标准溶液，对溶液进行连续进样，进样的次数为5次，之后要对5次的峰面积以及保留时间的标准差进行计算，从而对其重现性进行评价。
精密度：通过对日内和日间变化的记录去确定精密度的检测所建立高效液相色谱法，日内变化主要是借助一天之内重复进标准品溶液5次最终确定下来的，而日间变化主要是连续6天进样，采用平行的方式对其进行处理，也就能够考察其日间的变化。
1.2.3回收率实验
回收率实验通常是借助向注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠样品溶液当中加入适量的头孢哌酮钠、舒巴坦钠和头孢哌酮杂质A标准样品的方式来对回收率进行测定，我们设定了3个平行的实验，根据建立的色谱条件对其进行测定，计算样品的平均回收率以及RSD。
2、结果
2.1线性、检出限和定量限检出结果
通过不同稀释浓度的标准品来确定检出限 （LOD） 和定量限（LOQ），直到通过检测信号高度为与基线噪音高的信噪比值分别为3：1 和 10：1 时，即为检出限（LOD）和定量限（LOQ）。标准曲线的相关数据如表 1 所示。
从表 1 可以看出，在标准品测定的浓度范围内，头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 的标准曲线方程在线性范围内有良好的相关 系 数 （R2≥0.997），LOQ 和 LOD 分 别 小 于 2.0 μg/mL 和 3.8μg/mL，这充分证明了所建方法的准确性和灵敏性。
2.2头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 重现性
头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 重现性数据如表2所示：
如表 2 所示，头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 的色谱峰保留时间的 RSD 值均小于 0.5%，且峰面积 RSD 均小于 5.0%，表明所建方法具有较好的重现性。
2.3精密度
头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质A 精密度如表3所示
如表 3 所示，头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 色谱峰日内和日间保留时间的 RSD 值均小于 0.6%，且日内和日间峰面积 RSD 均小于 5.0%，表明所建方法具有较好精密度。
2.4加样收率
头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质A 加样收率如表4所示：
如表 4 所示，头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 的加样回收率在 97.5%和 102.5%之间，RSD 均小于 5.0%，表明了所建 HPLC 检测方法具有良好的回收率。
样品检测的结果显示，注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠，根据事先建立的色谱条件进行高效液相色谱测定，含量及相关物质测定的结果如表5所示。
3、讨论
注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠，用于治疗由敏感细菌所引起的下列感染：呼吸道感染；泌尿道感染；腹膜炎、胆囊炎、胆管炎和其它腹内感染；败血症、脑膜炎；皮肤及软组织感染、眼部感染、骨骼及关节感染；盆腔炎、子宫内膜炎、淋病和其它生殖器道感染等；预防因腹腔、妇科、心血管、骨科及整形手术所引起的手术后感染。
应用头孢哌酮钠舒巴坦钠前必须详细询问患者先前有否对本品、其他头孢菌素类、青霉素类或其他药物的过敏史，因为在青霉素类和头孢菌素类等β内酰胺类抗生素之间可能存在交叉过敏反应。在青霉素类抗生素过敏患者中约5%～10%可对头孢菌素出现交叉过敏反应。因此有青霉素类过敏史的患者，有指征应用本品时，必须充分权衡利弊后在严密观察下慎用。应用本品时，一旦发生过敏反应，需立即停药。如发生过敏性休克，需立即就地抢救，予以肾上腺素、保持呼吸道通畅、吸氧、糖皮质激素及抗组胺药等紧急措施。
本文所建立高效液相色谱法具有良好的线性关系，同时还具备非常强的重复性，在精密度方面也有着非常好的表现，回收率高，比较适合使用在注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠样品中头孢哌酮钠、舒巴坦钠和头孢哌酮杂质A的分析和检测当中，对有关物质的控制和分析有着十分积极的作用和非常重要的意义。
参考文献：
[1] 邬伟魁，严倩茹. 超高效液相色谱法在药物有关物质分析中的应用[J]. 中国药物评价. 2015（05）
[2] 盛丽英，王丽英，刘震霞. 头孢哌酮钠-舒巴坦钠（1：1）的临床应用进展[J]. 中国医药导报. 2007（29）
关键词：高效液相色谱法；头孢哌酮钠舒巴坦钠；测定
注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠是一种头孢菌素，它是光谱抗菌药中重要的一种，这种药物在生产、运输和贮藏的过程中可能产生一些杂质，主要有头孢哌酮杂质A和头孢哌酮其他的降解反应物，所以，为了更好的对药物当中的杂质进行有效的控制，本文采用了高效液相色谱法对两组分的含量以及相关物质的含量进行了测定，这一研究对了解相关物质的有效控制有着非常积极的作用。
1、方法
1.1高效液相色譜分析检测条件
色谱柱：Phenomenex CuroSil-PFP（5μm，250 mm × 4.6 mm i.d.）；流动相：5 mM 甲酸铵 - 乙腈（5：1，v/v），用甲酸调节 pH 至 4.0；流速：0.8 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：233 nm；进样量：5 μL。
1.2化学方法验证
我们将高效液相色谱的梯度色谱条件创建之后，需要开展验证实验，其中的项目主要有线性、检出限、测定限、重现性、精密度、稳定性和回收率等等。
1.2.1线性、检出限和定量限
精准的量取已经制备好的头孢哌酮钠、舒巴坦钠和头孢哌酮杂质A的标准品，同时将其配制成浓度范围为20—500μg/ml的溶液，分别采用高效液相色谱法来测定。不同浓度的液体应该重复检测三次，对色谱的峰面积进行准确的记录，通过平均的峰面积（Y）和对应的标准品浓度（X）之间存在的线性关系绘制出对应的标准曲线。
1.2.2重现性、精密度
重现性：准确的量取已经制备好的头孢哌酮钠、舒巴坦钠和头孢哌酮杂质A的混合标准溶液，对溶液进行连续进样，进样的次数为5次，之后要对5次的峰面积以及保留时间的标准差进行计算，从而对其重现性进行评价。
精密度：通过对日内和日间变化的记录去确定精密度的检测所建立高效液相色谱法，日内变化主要是借助一天之内重复进标准品溶液5次最终确定下来的，而日间变化主要是连续6天进样，采用平行的方式对其进行处理，也就能够考察其日间的变化。
1.2.3回收率实验
回收率实验通常是借助向注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠样品溶液当中加入适量的头孢哌酮钠、舒巴坦钠和头孢哌酮杂质A标准样品的方式来对回收率进行测定，我们设定了3个平行的实验，根据建立的色谱条件对其进行测定，计算样品的平均回收率以及RSD。
2、结果
2.1线性、检出限和定量限检出结果
通过不同稀释浓度的标准品来确定检出限 （LOD） 和定量限（LOQ），直到通过检测信号高度为与基线噪音高的信噪比值分别为3：1 和 10：1 时，即为检出限（LOD）和定量限（LOQ）。标准曲线的相关数据如表 1 所示。
从表 1 可以看出，在标准品测定的浓度范围内，头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 的标准曲线方程在线性范围内有良好的相关 系 数 （R2≥0.997），LOQ 和 LOD 分 别 小 于 2.0 μg/mL 和 3.8μg/mL，这充分证明了所建方法的准确性和灵敏性。
2.2头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 重现性
头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 重现性数据如表2所示：
如表 2 所示，头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 的色谱峰保留时间的 RSD 值均小于 0.5%，且峰面积 RSD 均小于 5.0%，表明所建方法具有较好的重现性。
2.3精密度
头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质A 精密度如表3所示
如表 3 所示，头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 色谱峰日内和日间保留时间的 RSD 值均小于 0.6%，且日内和日间峰面积 RSD 均小于 5.0%，表明所建方法具有较好精密度。
2.4加样收率
头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质A 加样收率如表4所示：
如表 4 所示，头孢哌酮钠、舒巴坦钠、头孢哌酮杂质 A 的加样回收率在 97.5%和 102.5%之间，RSD 均小于 5.0%，表明了所建 HPLC 检测方法具有良好的回收率。
样品检测的结果显示，注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠，根据事先建立的色谱条件进行高效液相色谱测定，含量及相关物质测定的结果如表5所示。
3、讨论
注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠，用于治疗由敏感细菌所引起的下列感染：呼吸道感染；泌尿道感染；腹膜炎、胆囊炎、胆管炎和其它腹内感染；败血症、脑膜炎；皮肤及软组织感染、眼部感染、骨骼及关节感染；盆腔炎、子宫内膜炎、淋病和其它生殖器道感染等；预防因腹腔、妇科、心血管、骨科及整形手术所引起的手术后感染。
应用头孢哌酮钠舒巴坦钠前必须详细询问患者先前有否对本品、其他头孢菌素类、青霉素类或其他药物的过敏史，因为在青霉素类和头孢菌素类等β内酰胺类抗生素之间可能存在交叉过敏反应。在青霉素类抗生素过敏患者中约5%～10%可对头孢菌素出现交叉过敏反应。因此有青霉素类过敏史的患者，有指征应用本品时，必须充分权衡利弊后在严密观察下慎用。应用本品时，一旦发生过敏反应，需立即停药。如发生过敏性休克，需立即就地抢救，予以肾上腺素、保持呼吸道通畅、吸氧、糖皮质激素及抗组胺药等紧急措施。
本文所建立高效液相色谱法具有良好的线性关系，同时还具备非常强的重复性，在精密度方面也有着非常好的表现，回收率高，比较适合使用在注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠样品中头孢哌酮钠、舒巴坦钠和头孢哌酮杂质A的分析和检测当中，对有关物质的控制和分析有着十分积极的作用和非常重要的意义。
参考文献：
[1] 邬伟魁，严倩茹. 超高效液相色谱法在药物有关物质分析中的应用[J]. 中国药物评价. 2015（05）
[2] 盛丽英，王丽英，刘震霞. 头孢哌酮钠-舒巴坦钠（1：1）的临床应用进展[J]. 中国医药导报. 2007（29）