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目的建立髁突软骨细胞的永生化细胞系。方法构建含有SV40大T抗原基因和neo抗性基因的逆转录病毒载体pLN/SV40，用常规脂质体转染的方法将目的基因导入包装细胞PA317，G418筛选出阳性克隆后，收集其病毒上清感染原代培养的新西兰白兔髁突软骨细胞(mandibular condylar chondrocyte, MCC)，G418筛选阳性克隆并挑选单克隆。设计大T抗原基因的特异性引物，用PCR检测不同克隆株对目的基因的整合。对所挑选的阳性克隆株进行扩增培养及常规的冻存复苏，比较其与MCC在形态增殖等方面特征。结果 10个阳性克隆株成功扩增出了1 196 bp的基因片断，有5株细胞传代超过30次，其中克隆株A21已在体外1.5年稳定传代100次以上，命名为永生化髁突软骨细胞（immortalized mandibular condylar chondrocyte，IMCC）。IMCC和MCC的倍增时间分别是30.86 h和78.95 h。IMCC的形态以多角形为主，传代、冻存和复苏对细胞形态及生长无明显影响。结论已建立了1株永生化的髁突软骨细胞系。