人趋化因子受体CXCR4基因的克隆及原核表达

来源 :生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xinmo2009
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目的:构建人CXCR4原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达。方法:从健康人外周血单个核细胞提取总RNA,以RT—PCR获得CXCR.4基因全长1059bp的完整编码序列,将其克隆人载体pMD-18T中,经限制性内切酶和菌落PCR分析并测序证实的阳性重组子与表达载体pET-28a(+)连接并转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果:12%SDS—PAGE分析表明,在30℃以IPTG诱导获得分子量为43ku的His-CXCR4融合蛋白表达带,诱导4h后此蛋白表达量约为全菌总蛋白的25%。结论:成功获得人CXCR4基
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