【摘 要】
：
目的 探讨丙泊酚调控miR-133a/聚合酶链反应(AQP)1表达对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响.方法 将体外培养的H9c2细胞分为对照组(正常培养)、H/R组(行H/R处理)、H/R+丙泊酚组(在H/R处理前给予25μmol/L丙泊酚预处理),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测H9c2细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测H9c2细胞上清液中LDH释放量,流式细胞仪检测H9c2细胞凋亡率,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3试剂盒检测H9c2细胞的Caspase-
【机 构】
：
天津市西青医院麻醉科,天津 300380;天津市环湖医院麻醉科;天津市环湖医院手术室
论文部分内容阅读
目的 探讨丙泊酚调控miR-133a/聚合酶链反应(AQP)1表达对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的影响.方法 将体外培养的H9c2细胞分为对照组(正常培养)、H/R组(行H/R处理)、H/R+丙泊酚组(在H/R处理前给予25μmol/L丙泊酚预处理),采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测H9c2细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测H9c2细胞上清液中LDH释放量,流式细胞仪检测H9c2细胞凋亡率,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3试剂盒检测H9c2细胞的Caspase-3活性,实时荧光定量水通道蛋白(PCR)检测H9c2细胞中miR-133a的表达水平,Western印迹检测H9c2细胞中AQP1蛋白表达;转染miR-133a inhibitor后,观察miR-133a低表达对丙泊酚保护H/R诱导的H9c2细胞损伤及AQP1蛋白表达的影响.采用双荧光素酶报告基因验证miR-133a与AQP1的靶向关系.结果 与对照组比较,H/R处理可引起H9c2细胞损伤,表现为H9c2细胞存活率和细胞中miR-133a的表达水平明显降低,且细胞上清液中LDH释放量、细胞凋亡率和Caspase-3活性明显升高(均P<0.05);与H/R组比较,丙泊酚处理后H/R诱导的H9c2细胞损伤明显改善(P<0.05).转染miR-133a inhibitor成功下调miR-133a表达后,丙泊酚对H/R诱导的H9c2细胞损伤的改善作用及对H9c2细胞中AQP1蛋白表达的抑制作用明显减弱(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验证实AQP1是miR-133a的靶基因.结论 丙泊酚可通过调控miR-133a/AQP1表达保护H/R诱导的H9c2细胞损伤.
其他文献
目的 探讨miR-324-5p对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响及调控机制.方法 培养正常宫颈细胞Ectl/E6E7和宫颈癌细胞系Hela、C-33A、CaSki、SiHa,实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-324-5p和甲状腺激素受体因子(TRIP)13 mRNA表达,Western印迹检测TRIP13蛋白表达.转染miR-324-5p模拟物或TRIP13小干扰RNA、或共转染miR-324-5p模拟物和TRIP13过表达载体至Hela细胞,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,T
目的 观察红芪多糖(HPS)对异丙肾上腺素(ISO)刺激大鼠心室重构(VR)的影响及机制.方法 采用皮下注射ISO诱导大鼠VR模型,持续14 d.方法 大鼠随机分为对照(CON)组、异丙肾上腺素模型(ISO)组、低剂量(HPS-L)组、中剂量(HPS-M)组和高剂量(HPS-H)组.灌胃给药21 d后计算大鼠心脏重量/体重比(HW/BW)、左室重量/心脏重量比(LVW/HW)、羟脯氨酸(HYP)含量;Masson特染测定心肌胶原容积分数(CVF)及血管周围胶原面积(PVCA).免疫组化检测心肌组织核因子(
目的 探讨川陈皮素对β 淀粉样蛋白(Aβ)25～35诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及潜在机制.方法 SH-SY5Y细胞培养至对数生长期,分为正常对照组、Aβ25～35损伤组及川陈皮素25、50、100μmol/L组,培养24 h后检测细胞存活率、氧化应激水平、凋亡率、凋亡相关基因及磷酸化-蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化-雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白表达等指标.结果 与Aβ25～35损伤组比较,川陈皮素各浓度处理组SH-SY5Y细胞的存活率显著增加(P<0.05),而乳酸脱氢酶(LDH)活性
目的 研究RNF181在头颈部鳞癌中的表达水平及其临床病理意义.方法 采用免疫组织化学染色检测RNF181在62例头颈部鳞癌及10例癌旁组织中的表达情况,分析其表达情况与患者年龄、性别、肿瘤直径、病理分级、TNM分期之间的关系.在口腔鳞癌细胞系Tca-8113中过表达RNF181,通过MTT检测其增殖能力,通过Western印迹检测细胞周期相关蛋白CyclinD1、CDK4及p18的表达情况.结果 RNF181主要定位于细胞质,在头颈部鳞癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织(P<0.0001),且与病理学分
目的 探讨miR-423-5p对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞损伤的影响及作用机制.方法 采用H2 O2诱导人晶状体上皮细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中miR-423-5p和泛素羧基末端水解酶(UCH)L1 mRNA表达水平,Western印迹检测UCHL1、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)水平,流式细胞仪检测细胞凋亡.转染miR-
目的 探讨荞麦花叶芦丁对高糖诱导的人晶状体上皮细胞损伤的影响及其对LncRNA FENDRR/miR-146b-3p分子轴的调控作用.方法 采用高糖诱导人晶状体上皮细胞建立细胞损伤模型(Model组),分别加入不同剂量的荞麦花叶芦丁处理细胞;实验分组:Con组、Model+si-NC组、Model+si-FENDRR组、Model+miR-NC组、Model+miR-146b-3p组、Model+荞麦花叶芦丁+anti-miR-NC组、Model+荞麦花叶芦丁+anti-miR-146b-3p组;采用流式
目的 探讨lncRNA MCM3AP-AS1对氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 用10 mg/L OX-LDL诱导HUVEC细胞48 h,qRT-聚合酶链反应(PCR)检测细胞中MCM3AP-AS1、miR-205-5p和神经生长调节因子(NEGR)1 mRNA表达水平,Western印迹检测NEGR1蛋白表达.分别转染MCM3AP-AS1小干扰RNA、NEGR1小干扰RNA、miR-205-5p模拟物(mimics)或共转染MCM3A
目的 探讨尤瑞克林(HUK)对脑缺血再灌注损伤小鼠脑组织保护作用的机制.方法 60只ICR小鼠随机分为3组:假手术组、I/R+NS组和I/R+HUK组,用线栓法制作小鼠大脑中动脉短暂性脑缺血再灌注损伤模型,治疗72 h后,观察各组小鼠神经功能缺损评分,采用2,3,5-苯氯化四氮唑(TTC)染色检测梗死面积百分比,Western印迹检测小鼠缺血侧海马组织丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路相关蛋白ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax表达,TUNEL法检测凋亡细胞
目的 采用UPLC-Q-Exactive-MS为基础的代谢组学技术,研究清肺化痰颗粒(QFHT)对卵清白蛋白(OVA)致小鼠哮喘的调控作用.方法 选取48只KM小鼠,按体重分为对照组、模型组、地塞米松磷酸钠阳性组、QFHT给药组,采用3项血清生化指标评价哮喘模型及QFHT的干预作用,应用UPLC-Q-Exactive-MS对小鼠血清和肺组织样本进行非靶向代谢组学研究,获取OVA诱导哮喘的潜在生物标志物及其代谢通路.结果 QFHT能显著降低小鼠血清中免疫球蛋白(Ig)E、白细胞介素(IL)-4和肿瘤坏死因子
目的 观察姜黄素对Jurkat细胞的作用,研究内质网应激信号在姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡中的作用.方法 在体外培养体系中,通过甲基噻唑蓝(MTT)比色法分析姜黄素对Jurkat细胞存活和增殖的作用,流式细胞学分析姜黄素对Jurkat细胞凋亡的作用,Western印迹检测Jurkat细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3和内质网应激凋亡信号葡萄糖调节蛋白78、C/EBP同源蛋白和Caspase4的表达.结果 姜黄素抑制Jurkat细胞存活,促进Jurkat细胞凋亡.增加姜黄素浓度,Jur