【摘 要】
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目的:探讨miR-324-3p对前列腺癌(PCa)细胞铁死亡的影响及其分子作用机制.方法:通过qRT-PCR检测PCa组织、癌旁组织和细胞系中miR-324-3p和GPX4 mRNA的表达水平;采用Western blot检测PCa细胞系中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达水平;CCK-8检测PCa细胞增殖活力;运用谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测PCa细胞中GSH水平,脂质过氧化(MDA)试剂盒检测PCa细胞脂质氧化水平,DCFH-DA荧光探针法检测PCa细胞中活性氧(ROS)水平;双萤光素酶报告基
【机 构】
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南阳市第二人民医院 南阳 473000
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目的:探讨miR-324-3p对前列腺癌(PCa)细胞铁死亡的影响及其分子作用机制.方法:通过qRT-PCR检测PCa组织、癌旁组织和细胞系中miR-324-3p和GPX4 mRNA的表达水平;采用Western blot检测PCa细胞系中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达水平;CCK-8检测PCa细胞增殖活力;运用谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测PCa细胞中GSH水平,脂质过氧化(MDA)试剂盒检测PCa细胞脂质氧化水平,DCFH-DA荧光探针法检测PCa细胞中活性氧(ROS)水平;双萤光素酶报告基因验证miR-324-3p和GPX4的靶向关系.结果:PCa组织中miR-324-3p的表达水平低于对应的癌旁组织,且PCa细胞中miR-324-3p的表达水平低于正常前列腺上皮细胞;而PCa组织和细胞中GPX4的表达水平高于对应的癌旁组织和正常前列腺上皮细胞.双萤光素酶报告实验表明,miR-324-3p直接靶向负调控GPX4.过表达miR-324-3p可明显抑制PCa细胞增殖活力,降低了 GSH水平,上调了脂质氧化水平和ROS水平;而铁死亡抑制剂Fer-1或GPX4可逆转miR-324-3p对PCa细胞铁死亡的促进作用.结论:miR-324-3p通过靶向负调控GPX4的表达促进PCa细胞铁死亡,进而在PCa发挥抗癌作用.
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