KIR2DS2基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

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目的:构建携带KIR2DS2基因短发夹状干扰RNA(short hairin RNA,shRNA)的RNAi慢病毒载体。方法:针对已经筛选确定的KIR2DS2基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经HpaI和XhoI酶切后的pSicoR.GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LV—shKIR2DS2慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用LV—shKIR2DS2及Packaging system质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,以29
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