胎鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养、纯化与鉴定

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目的探讨胎鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养、纯化与鉴定的方法,为胎儿和早产儿骨骼肌发育程序化的研究提供实验基础。方法Sprague—Dawley大鼠孕18d时剖宫取出胎鼠,手术显微镜下取胎鼠四肢骨骼肌肌肉,采用I型胶原酶和胰蛋白酶两步消化法分离胎鼠骨骼肌卫星细胞,差速贴壁法进行纯化。原代培养的生长培养基为(DMEM/F12+20%FBS+10%HS+5ng/mlbFGF)。分化培养基为(DMEM/F12+2%HS)。CCK-8法绘制胎鼠骨骼肌卫星细胞生长曲线图,细胞免疫组化染色鉴定纯化后细胞的肌源性标志蛋白De
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