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摘要:本文以美国红栌的休眠枝条和当年生嫩枝茎段为外植体进行组织培养试验,从而证明了植物在园林绿化中所起的重要性。
关键词:红栌;试验;重要性
Abstract: In this paper, taking the United States of America red nouelia dormant branches and current-year shoots stems as explants for tissue culture experiment, which proves the importance of plants in the landscaping.
Keywords: Red Lu; test; importance
中图分类号:TU986.2
美国红栌属漆树科( Anarcardiaceae )黄栌属( Cotinus Adans ),是黄栌的一个变种,又名红叶树、烟樹,原产美国。美国红栌为落叶乔木,对环境适应性强;喜光,也耐半荫;抗病虫能力强。
美国红栌的独特色彩及生长特性优于现在园林应用中的主要彩叶树种紫叶李和红叶小檗等,其适应性强,栽培简便,可用于荒山绿化,厂矿净化和美化。作为城市道路及市区绿化树种,其叶片颜色的变化会在春、夏、秋三季产生不同的视觉效果,为美化城市环境增添新的景色。还可用于庭院绿化、室内盆栽。
美国红栌在城市及公园绿化中是不可多得的乔木阔叶彩色新树种。
美国红栌通常采用种子繁殖和嫁接繁殖,但种子繁殖中种子昂贵且发芽率不高,一般只有40%-60%;嫁接繁殖成活率更低。而采用组织培养方式,建立快繁体系,可以在短期内提供大量种苗,以供园林绿化所用。
以美国红栌的休眠枝条和当年生嫩枝茎段为外植体进行组织培养试验。
实验方案:
一)外植体的选择、采取及灭菌
美国红栌能够产生再生植株的部位较多,如茎尖、茎段、侧芽、叶片等。以快速繁殖为目的,最好采用茎尖或侧芽,又因为红栌易产生褐化现象,所以采用休眠芽较多。一般应选择无病虫害、粗壮的茎尖和茎段;若选择休眠芽,应选择饱满、健壮的休眠芽。
采取:
用锋利的手术刀将红栌植株上生长健壮、饱满的新发嫩枝(一定得注意材料的老嫩程度,应取刚发出,木质化程度低的嫩枝)切下,一般长10厘米左右。采下后放入带盖培养瓶中(保湿),带回实验室。若用休眠芽,选择健壮的休眠枝,截成2-3厘米,带1-2个休眠芽的小段。
灭菌:
嫩枝:①将材料上叶片切去,留下一小段叶柄(以便消毒后将其切去)。 放在自来水下冲洗5分钟,后用洗洁净清洗,自来水冲洗干净。
②拿到超净工作台,75%酒精浸泡30秒,迅速放入0.1%升汞溶液中消毒12分钟,浸泡时可不时地轻轻晃动瓶子。
③无菌水冲洗5次,每次5分钟左右。
④将材料放在消毒纸上处理:上端、下端均切去一部分,将叶柄切去一大部分,总之,有伤口接触升汞的地方都要切去一部分。然后,按每段2-3个侧芽分切好。接种。
休眠芽:①将健壮的休眠枝,截成2-3厘米,带1-2个休眠芽的小段,放到自来水下冲洗,洗洁净清洗,自来水冲洗干净。
②拿到超净工作台,75%酒精浸泡30秒, 0.1%升汞溶液中消毒20分钟,浸泡时可不时地轻轻晃动瓶子。
③无菌水冲洗5次 ,消毒纸上切取休眠芽(注意:切取时芽周围应稍带木质部,不能切得太小,也不能太大),接种。暗培养(可降低褐化),待长出芽后放在光下。
二)初代培养
应选择适宜的诱导培养基,红栌的用:MS 或MS+6-BA0.6+KT0.1+NAA0.1+蔗糖30g/L+琼脂6g/L即可。培养基PH为5.8;培养温度为25℃-28℃;光照强度为2000lx;光照长度为12h/d。
三)继代培养
一般经过20天左右,红栌外植体就长成4-5厘米的无根小苗,此时可进行继代转接。
经过反复试验,挑选出继代培养基:MS+6-BA0.6+KT0.1+NAA0.1+蔗糖30g/L+琼脂6g/L或MS+6-BA0.5+KT0.5+IAA0.2+蔗糖30g/L+琼脂6g/L。
具体的方法是:以初代培养所得试管苗嫩茎为材料,将嫩茎切成1-2个节带1-2个芽的小段,将切段基部插入继代培养基中。注意:一般应选择锋利的双刃剃须刀片,将其实验前浸泡在95%酒精里,操作时用镊子夹出放到消毒纸上吸干酒精后,再切转材料,不放在酒精火焰上灼烧,这样褐化现象会减轻;切材料时刀口应在芽下方2毫米左右,这样芽萌发的较快;材料基部愈伤组织应切除干净,以便离体彻底,减少原有组织的影响。培养条件同初代培养。一般30天左右为一个继代周期。
四)生根
经试验比较适合的生根培养基:
1/2MS+NAA0.2+IBA0.5+Vc150
1/3MS+NAA0.2+IBA0.5+Vc150
1/3MS+NAA0.5+IBA0.5+Vc150
具体方法:一般切取3厘米左右带叶片的健壮小段,插入生根培养基中,一般10天左右可生根。
五)炼苗
可选用地上苗床或地苗床,现以地苗床为例。
苗床上最下面可铺砖一层,留有2cm砖缝灌入粗沙,以便透水。上面可铺10cm炼苗专用混合基质。
基质一般用草炭:珍珠岩:蛭石=2:1:1。按上述比例将基质充分混合,每立方混合基质中加入辛硫磷颗粒100克、五氯硝基苯50克、甲苯200毫升调制均匀,或用1:300的高锰酸钾溶液淋湿调制均匀,后用厚农膜覆盖。根据天气情况,冬天闷制5天,夏天闷制2天左右。闷制好后进行平摊凉晒,冬天2天,夏天24小时以上。晾晒好的基质就可备用了。
试管苗生根后,连瓶一起放入炼苗室,以适应光照、温度、湿度的变化,并将瓶盖拧松。3-5天(如果是夏天可缩短到1-2天)后,打开瓶口取出试管苗,按一定株行距植于铺好介质的苗床上,浇透水,加盖拱棚覆膜保持湿度,4月-10月用地膜覆盖,上部留有20cm放风口;11月-3月可用无滴膜覆盖,以利保温。及时地通风换气,及时地浇水、喷肥、喷杀菌杀虫药,防止有害菌类及病虫害的危害,尽量提高试管苗的成活率。
关键词:红栌;试验;重要性
Abstract: In this paper, taking the United States of America red nouelia dormant branches and current-year shoots stems as explants for tissue culture experiment, which proves the importance of plants in the landscaping.
Keywords: Red Lu; test; importance
中图分类号:TU986.2
美国红栌属漆树科( Anarcardiaceae )黄栌属( Cotinus Adans ),是黄栌的一个变种,又名红叶树、烟樹,原产美国。美国红栌为落叶乔木,对环境适应性强;喜光,也耐半荫;抗病虫能力强。
美国红栌的独特色彩及生长特性优于现在园林应用中的主要彩叶树种紫叶李和红叶小檗等,其适应性强,栽培简便,可用于荒山绿化,厂矿净化和美化。作为城市道路及市区绿化树种,其叶片颜色的变化会在春、夏、秋三季产生不同的视觉效果,为美化城市环境增添新的景色。还可用于庭院绿化、室内盆栽。
美国红栌在城市及公园绿化中是不可多得的乔木阔叶彩色新树种。
美国红栌通常采用种子繁殖和嫁接繁殖,但种子繁殖中种子昂贵且发芽率不高,一般只有40%-60%;嫁接繁殖成活率更低。而采用组织培养方式,建立快繁体系,可以在短期内提供大量种苗,以供园林绿化所用。
以美国红栌的休眠枝条和当年生嫩枝茎段为外植体进行组织培养试验。
实验方案:
一)外植体的选择、采取及灭菌
美国红栌能够产生再生植株的部位较多,如茎尖、茎段、侧芽、叶片等。以快速繁殖为目的,最好采用茎尖或侧芽,又因为红栌易产生褐化现象,所以采用休眠芽较多。一般应选择无病虫害、粗壮的茎尖和茎段;若选择休眠芽,应选择饱满、健壮的休眠芽。
采取:
用锋利的手术刀将红栌植株上生长健壮、饱满的新发嫩枝(一定得注意材料的老嫩程度,应取刚发出,木质化程度低的嫩枝)切下,一般长10厘米左右。采下后放入带盖培养瓶中(保湿),带回实验室。若用休眠芽,选择健壮的休眠枝,截成2-3厘米,带1-2个休眠芽的小段。
灭菌:
嫩枝:①将材料上叶片切去,留下一小段叶柄(以便消毒后将其切去)。 放在自来水下冲洗5分钟,后用洗洁净清洗,自来水冲洗干净。
②拿到超净工作台,75%酒精浸泡30秒,迅速放入0.1%升汞溶液中消毒12分钟,浸泡时可不时地轻轻晃动瓶子。
③无菌水冲洗5次,每次5分钟左右。
④将材料放在消毒纸上处理:上端、下端均切去一部分,将叶柄切去一大部分,总之,有伤口接触升汞的地方都要切去一部分。然后,按每段2-3个侧芽分切好。接种。
休眠芽:①将健壮的休眠枝,截成2-3厘米,带1-2个休眠芽的小段,放到自来水下冲洗,洗洁净清洗,自来水冲洗干净。
②拿到超净工作台,75%酒精浸泡30秒, 0.1%升汞溶液中消毒20分钟,浸泡时可不时地轻轻晃动瓶子。
③无菌水冲洗5次 ,消毒纸上切取休眠芽(注意:切取时芽周围应稍带木质部,不能切得太小,也不能太大),接种。暗培养(可降低褐化),待长出芽后放在光下。
二)初代培养
应选择适宜的诱导培养基,红栌的用:MS 或MS+6-BA0.6+KT0.1+NAA0.1+蔗糖30g/L+琼脂6g/L即可。培养基PH为5.8;培养温度为25℃-28℃;光照强度为2000lx;光照长度为12h/d。
三)继代培养
一般经过20天左右,红栌外植体就长成4-5厘米的无根小苗,此时可进行继代转接。
经过反复试验,挑选出继代培养基:MS+6-BA0.6+KT0.1+NAA0.1+蔗糖30g/L+琼脂6g/L或MS+6-BA0.5+KT0.5+IAA0.2+蔗糖30g/L+琼脂6g/L。
具体的方法是:以初代培养所得试管苗嫩茎为材料,将嫩茎切成1-2个节带1-2个芽的小段,将切段基部插入继代培养基中。注意:一般应选择锋利的双刃剃须刀片,将其实验前浸泡在95%酒精里,操作时用镊子夹出放到消毒纸上吸干酒精后,再切转材料,不放在酒精火焰上灼烧,这样褐化现象会减轻;切材料时刀口应在芽下方2毫米左右,这样芽萌发的较快;材料基部愈伤组织应切除干净,以便离体彻底,减少原有组织的影响。培养条件同初代培养。一般30天左右为一个继代周期。
四)生根
经试验比较适合的生根培养基:
1/2MS+NAA0.2+IBA0.5+Vc150
1/3MS+NAA0.2+IBA0.5+Vc150
1/3MS+NAA0.5+IBA0.5+Vc150
具体方法:一般切取3厘米左右带叶片的健壮小段,插入生根培养基中,一般10天左右可生根。
五)炼苗
可选用地上苗床或地苗床,现以地苗床为例。
苗床上最下面可铺砖一层,留有2cm砖缝灌入粗沙,以便透水。上面可铺10cm炼苗专用混合基质。
基质一般用草炭:珍珠岩:蛭石=2:1:1。按上述比例将基质充分混合,每立方混合基质中加入辛硫磷颗粒100克、五氯硝基苯50克、甲苯200毫升调制均匀,或用1:300的高锰酸钾溶液淋湿调制均匀,后用厚农膜覆盖。根据天气情况,冬天闷制5天,夏天闷制2天左右。闷制好后进行平摊凉晒,冬天2天,夏天24小时以上。晾晒好的基质就可备用了。
试管苗生根后,连瓶一起放入炼苗室,以适应光照、温度、湿度的变化,并将瓶盖拧松。3-5天(如果是夏天可缩短到1-2天)后,打开瓶口取出试管苗,按一定株行距植于铺好介质的苗床上,浇透水,加盖拱棚覆膜保持湿度,4月-10月用地膜覆盖,上部留有20cm放风口;11月-3月可用无滴膜覆盖,以利保温。及时地通风换气,及时地浇水、喷肥、喷杀菌杀虫药,防止有害菌类及病虫害的危害,尽量提高试管苗的成活率。