观察自噬抑制剂能否增强三阴性乳腺癌(TNBC)细胞系MDA-MB-468和MDA-MB-231对表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂吉非替尼的敏感性。
方法以吉非替尼单药或联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)或巴弗洛霉素A1(BAF)处理MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞，以及雌激素受体阳性的MCF-7细胞，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot法检测自噬标记蛋白以及凋亡通路相关蛋白的表达。
结果吉非替尼对吉非替尼＋3-MA组和吉非替尼＋BAF组MDA-MB-468细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(4.1±0.2)μmol/L和(3.8±0.3)μmol/L，均明显低于吉非替尼组MDA-MB-468细胞[(7.0±0.2)μmol/L，均P<0.05]。吉非替尼对吉非替尼＋3-MA组和吉非替尼＋BAF组MDA-MB-231细胞的IC50分别为(9.7±0.1)μmol/L和(7.7±0.2)μmol/L，均明显低于吉非替尼组MDA-MB-231细胞[(14.7±0.1)μmol/L，均P<0.05]。吉非替尼组、吉非替尼＋3-MA组、吉非替尼＋BAF组MDA-MB-468细胞的凋亡率分别(12.43±3.18)%、(23.37±2.71)%和(18.71±2.81)%，吉非替尼联合自噬抑制剂3-MA或BAF时，MDA-MB-468细胞的凋亡率均明显高于单用吉非替尼时的凋亡率(均P<0.05)。吉非替尼组、吉非替尼＋3-MA组、吉非替尼＋BAF组MDA-MB-231细胞的凋亡率分别为(12.15±1.82)%、(16.94±2.19)%和(33.83±5.92)%，吉非替尼联合自噬抑制剂3-MA或BAF时，MDA-MB-231细胞的凋亡率均明显高于单用吉非替尼时的凋亡率(均P<0.05)。吉非替尼联合3-MA或BAF对MCF-7细胞的凋亡无明显影响(P>0.05)。吉非替尼联合3-MA或BAF后，MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞中p-PTEN的表达明显增加，LC3和p-Akt蛋白表达明显下调，cleaved caspase-9和cleaved caspase-3蛋白的活性增加。
结论自噬抑制剂可能通过激活PTEN/PI3K/Akt通路相关蛋白的表达增强MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞对吉非替尼的敏感性；自噬抑制剂联合吉非替尼可能通过启动caspase级联反应促进MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞凋亡。