重组人组织型纤溶酶原激活物衍生物在大肠杆菌中表达的研究

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重组人组织型纤溶酶原激活物衍生物(K2P)体内半衰期长优于天然tPA.在原核系统中直接表达K2P的表达量很低,仅5%左右,构建Trx-K2P融合蛋白后可将表达量提高至10%.为了进一步提高产量,使用诱导剂(IPTG)作为选择压力对重组菌株进行培养和筛选,获得了变异的宿主菌,有效地提高了融合蛋白在大肠杆菌T7启动子系统中的表达,诱导5h后表达量达到了28.8%.同时宿主菌获得了对诱导剂的耐受性,能在诱导后持续生长,最终增加了目的蛋白的产量.
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