【摘 要】
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目的:探讨沉默BRG1基因对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:体外化学合成BRG1siRNA和对照siRNA(si-Ctrl),脂质体介导转染胶质瘤U251和U87细胞,Transwell迁移实验
【机 构】
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江苏省肿瘤生物治疗重点实验室,徐州医学院医学影像学院,徐州医学院附属医院神经外科,
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目的:探讨沉默BRG1基因对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:体外化学合成BRG1siRNA和对照siRNA(si-Ctrl),脂质体介导转染胶质瘤U251和U87细胞,Transwell迁移实验和侵袭实验观察沉默BRG1基因对两种胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响,明胶酶谱实验检测MMP-2变化,蛋白质印迹法检测TIMP-2和MMP2蛋白表达。结果:Transwell迁移实验中,转染BRG1siRNA组U251细胞穿越Transwell小室的细胞个数为23.13±1.20,与对照组96.38±9.67相比,减少了76%,P=0.000 1;U87穿越细胞个数为37.33±2.31,对照组为233.31±19.37,减少了84%,P<0.001。侵袭实验中,转染BRG1siRNA组U251细胞穿越Transwell小室的细胞个数为26.27±1.05,与对照组97.30±9.35比较,减少了73%,P=0.000 1;U87穿越细胞个数为32.83±2.42,对照组为234.50±15.67,减少了86%,P<0.001。与对照组相比,蛋白质印迹法显示,BRG1沉默后TIMP-2表达升高,MMP-2表达下降;明胶酶谱实验显示,BRG1沉默后MMP-2酶活性降低。结论:BRG1基因沉默通过上调TIMP-2抑制MMP-2的表达,破坏TIMP-2/MMP-2平衡,最终抑制胶质瘤细胞迁移和侵袭能力。
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