【摘 要】
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目的研究重组小鼠CK2α亚基在大肠杆菌中的表达,并进行纯化和活性的测定.方法将已构建成功的小鼠蛋白激酶CK2α亚基cDNA的重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达,产
【机 构】
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广东医学院生物化学和分子生物学研究所
【基金项目】
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广东省自然科学基金，广东省科技厅科技计划，广东省湛江市科技计划
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目的研究重组小鼠CK2α亚基在大肠杆菌中的表达,并进行纯化和活性的测定.方法将已构建成功的小鼠蛋白激酶CK2α亚基cDNA的重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达,产物依次进行DE-52、P11磷酸纤维素和肝素-Sepharose柱层析分离, SDS-PAGE银染.结果重组质粒转化表达菌经IPTG诱导后出现一分子量为42 ku蛋白过度表达,表达蛋白约占菌体总蛋白的30.6 %.从287 mg可溶性蛋白质中得到4.7 mg纯化蛋白.SDS-PAGE银染显示纯化的蛋白为单一蛋白带.纯化的
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