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目的:
分离纯化雪旺细胞胞浆神经营养蛋白并测定其等电点。
方法:培养收集新生1-3天SD乳鼠四肢神经雪旺细胞,超声粉碎,超速离心,取上清胞浆成份超滤浓缩,收集分子量>10 KDa浓缩蛋白液,通过DEAE-Sephacel离子交换层析,Sephadex G-100凝胶过滤层析和Diol-150高压液相分子筛层析进行分离纯化,等电聚焦电泳测定纯化的活性蛋白质等电点和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其亚基分子量。
结果:成功地分离纯化出一种活性蛋白质,分子量约58 KDa,等电点4.55,
结论:联合应用超滤浓缩、离子交换层析、凝胶过滤层析和高压液相能较理想地分离纯化雪旺细胞胞浆蛋白。