【摘 要】
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目的 构建白念珠菌MTQ2基因缺失株,并检测该基因缺失对细胞生长及遗传毒性试剂耐受性的影响. 方法 采用整合型CRISPR/Cas9系统,将sgRNA克隆到pV1093质粒中,线性化后与含HIS1
【机 构】
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南通大学医学院病原生物学系,江苏南通226001
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目的 构建白念珠菌MTQ2基因缺失株,并检测该基因缺失对细胞生长及遗传毒性试剂耐受性的影响. 方法 采用整合型CRISPR/Cas9系统,将sgRNA克隆到pV1093质粒中,线性化后与含HIS1基因的修复DNA一起通过醋酸锂法转化白念珠菌野生型菌株SN148,于SD+ NAT-His培养基筛选转化子,通过PCR验证基因型,利用平板表型试验检测MTQ2缺失对细胞生长及遗传毒性试剂耐受性的影响. 结果 成功构建了MTQ2纯合子缺失菌株.MTQ2缺失导致串珠样细胞比例(44.4%)较野生型菌株(2.5%)显著增加,细胞增殖能力变弱,生长缺陷明显. 结论 利用整合型CRISPR/Cas9系统构建了白念珠菌MTQ2纯合子缺失菌株,且发现MTQ2基因可能参与维持细胞的增殖.
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