【摘 要】
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目的 探讨Dishevelled (Dvl)和β-catenin在骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨细胞自然退变中的表达情况.方法 将膝关节置换的OA患者关节软骨细胞进行体外分离培养,采用自
【机 构】
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第二军医大学附属长海医院,风湿免疫科,上海200433;解放军杭州疗养院,杭州,310007;第二军医大学附属长海医院,关节外科,上海200433
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目的 探讨Dishevelled (Dvl)和β-catenin在骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨细胞自然退变中的表达情况.方法 将膝关节置换的OA患者关节软骨细胞进行体外分离培养,采用自然传代的方法建立关节软骨退变模型.倒置显微镜观察P2、P6代关节软骨细胞的形态,流式细胞仪检测软骨细胞的凋亡情况.利用Q-PCR及Western blot法检测Dvl2和β-catenin基因和蛋白的表达情况.结果 成功分离并进行体外培养OA患者关节软骨细胞.P2代关节软骨细胞呈三角形或多角形;P6代时形态则变为梭形,并出现明显的纤维化.P6代时凋亡率(16.34％)显著高于P2代的凋亡率(8.63％).P2代Dvl2的mRNA相对表达量为P6代的3.629倍(P=0.004),蛋白表达量为P6代的2.548倍(P=0.03),β-catenin的mRNA相对表达量为P6代的5.087倍(P=0.001),蛋白表达量为P6代的4.4倍(P=0.003).结论 OA关节软骨细胞在体外自然退变过程中,凋亡增多,Dvl2及β-catenin表达则呈下降趋势.Dvl及Wnt/β-catenin在软骨细胞中的功能有待进一步研究.
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