【摘 要】
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目的构建异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)野生型/突变型基因慢病毒载体。方法构建IDH2野生型、突变型质粒,采用聚合酶链反应(PCR)进行鉴定;对感染293T细胞,测定病毒滴度;对感染HEK293
【机 构】
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宁夏医科大学临床医学院,宁夏医科大学基础医学院,宁夏医科大学基础医学院病理学系
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81560501),宁夏回族自治区人力资源和社会保障厅2017留学人员创新创业项目择优资助项目(宁人社函〔2017〕84号),宁夏回族自治区教育厅大学生创新训练项目(NXCX2018144)
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目的构建异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)野生型/突变型基因慢病毒载体。方法构建IDH2野生型、突变型质粒,采用聚合酶链反应(PCR)进行鉴定;对感染293T细胞,测定病毒滴度;对感染HEK293细胞,观察感染效率。结果PCR鉴定结果显示,2组重组质粒在1.0~2.0kb间各出现一条明显扩增带,片段大小与IDH2目的片段大小一致(1359bp)。对感染293T细胞观察发现,48h后绿色荧光的强度和范围明显增加;病毒滴度为:1.0×10^8TU/mL。感染HEK293细胞的效率在90%以上。结论IDH2
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