【摘 要】
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【目的】构建鼠源抗柑橘溃疡病菌二硫键稳定Fv抗体（dsFv）片段基因,原核表达并将其复性为具有免疫活性的dsFv抗体。【方法】采用PCR定点突变的方法构建dsFv重链（VH）及轻链可变区（VL
【机 构】
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重庆大学生物工程学院/重庆大学基因工程研究中心/重庆市基因功能与调控重点实验室,四川省泸州医学院免疫学教研室
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【目的】构建鼠源抗柑橘溃疡病菌二硫键稳定Fv抗体（dsFv）片段基因,原核表达并将其复性为具有免疫活性的dsFv抗体。【方法】采用PCR定点突变的方法构建dsFv重链（VH）及轻链可变区（VL）基因,分别将其连接入表达载体中,于E.coliBL21（DE3）中诱导表达,表达产物溶解后稀释入复性缓冲液中使其重折叠为dsFv抗体并纯化。SDS-PAGE及Western-blot分析表达及复性产物,BIAcore检测dsFv与Xac-LPS的亲和力,ELISA验证dsFv的特异性及稳定性。【结果】测序结果表明在
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