论文部分内容阅读
比较黑曲霉脂肪酶与黑曲霉酯酶的3-D结构发现二者在盖子结构域存在显著差异。根据已解析的酯酶的3-D结构信息，运用重叠延伸PCR技术，对黑曲霉脂肪酶的4个位点进行突变，以期获得开盖型黑曲霉脂肪酶。4个突变位点分别为形成黑曲霉脂肪酶盖子结构的α-螺旋与酯酶对应区域的α-螺旋相互置换；Ser84突变为Gly；Asp99突变为Pro；Lys108突变为Glu。4个重组质粒导入毕赤酵母GS115菌株进行异源表达后，仅pPCI9K-anl—D99P和pPCI9K-anl-K108E实现了活性表达。