胃癌相关基因GCRG213正反义真核表达载体的构建及鉴定

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目的:构建胃癌相关基因GCRG213JE、反义真核表达载体.方法:从pGEM-T质粒上扩增出的胃癌相关基因GCRG213的DNA片段,两端分别引入限制性内切酶KpnI,BamHI和EcoRI,BamHI识别位点.按正向、反向克隆入真核表达载体PcDNA3.1(+).测序正确的重组子PcDNA3.1.a(含GCRG213正向克隆),pcDNA3.1.b(含GCRG213反向克隆)和空载体经脂质体转染人胃癌细胞系MKN45细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞株,采用半定量RT-PCR及Westem blot比
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