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目的 表皮干细胞是皮肤发生、修复、重建的关键“种子细胞”，因而研究建立人表皮干细胞体外分离、培养及鉴定的方法非常重要。方法 通过本科消化法，分离小儿包皮的表皮与真皮层，表皮制成单细胞悬液，以高糖低钙的DMEM培养基，补充100ml/L的干细胞培养专用胎牛血清（FBS），0.05mmol/L氯化钙，10ng/ml表皮生长因子，1×10^-6mol/L氢化可的松进行培养，在实验之前用胶原Ⅳ包被直径35mm的培养皿，其中有些放置消毒盖坡片以制“细胞玻片”，置4℃冰箱中放置30min以上，吸干胶原Ⅳ，再