MicroRNA-17-92基因对胃癌干细胞更新和增殖的影响

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jibbsb12
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背景:研究表明,miRNA对肿瘤干细胞的更新分化有调节作用,有关miRNA-17-92在胃癌干细胞更新及增殖中的作用尚未完全阐明。目的:分析miRNA-17-92在胃癌干细胞自我更新及增殖中的作用。方法:1利用细胞培养使胃癌干细胞贴壁分化并送miRNA芯片检测,寻找并验证不断缺失的miRNA。2构建并转染mi RNA-17-92分子慢病毒稳定转染细胞。3通过tumorsphere实验研究miRNA-17-92与胃癌细胞更新的关系。4通过MTT、平板克隆试验检测miRNA-17-92与胃癌干细胞增殖的关系。结果与结论:1miR-19b/20a/92a在胃癌干细胞贴壁分化过程中表达逐渐减低。2慢病毒携带的miRNA-17-19基因在MKN28细胞和CD44~-/EpCAM~-细胞中的表达均明显增加;瞬时转染pre-miR-19b/20a/92a能使CD44~-/EpCAM~-和MKN28的miRNA表达增高,瞬时转染pre-miR-19b/20a/92a拮抗剂能使SGC7901和CD44~+/Ep CAM~+的miRNA表达降低;过表达lenti-miR-19b/20a/92a能显著增加胃癌细胞形成肿瘤球的能力;在化疗药的作用下,lenti-miR-19b/20a/92a感染细胞的生存时间延长;瞬时转染pre-miR-19b/20a/92a能够显著增加CD44~+/EpCAM~+细胞数,转染其拮抗剂可以降低CD44~+/EpCAM~+细胞数。3miR-19b/20a/92a稳定表达组的胃癌细胞增殖速度较对照组快。瞬间转染miR-19b/20a/92a前体组加快胃癌细胞的增殖速度,而瞬时转染其拮抗物组减慢胃癌细胞的增殖速度;瞬间转染miR-19b/20a/92a前体组的克隆数较对照组多,而瞬时转染miR-19b/20a/92a拮抗物组的克隆数较对照组少。结果表明miR-19b/20a/92a基因在胃癌干细胞分化过程中不断缺失,miR-17-92基因能够促进胃癌干细胞的更新和增殖。
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