促酰化蛋白对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响

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目的观察胰岛素抵抗状态下3T3-L1成熟脂肪细胞促酰化蛋白(acylation stimulating protein,ASP)刺激下脂代谢关键酶(LPL、HSL、perilipin、DGAT)基因表达的影响,以及胰岛素经典信号通路(IRS-1、PI3K)蛋白表达的影响。方法 3T3L-1脂肪细胞给予不同浓度(0、0.125、0.5、1.0mmol/L)油酸及棕榈酸孵育过夜。real-time PCR方法定量检测ASP刺激下脂肪细胞LPL、HSL、perilipin、DGAT基因表达水平。Western blot法检测ASP和INS刺激下脂肪细胞HSL、perilipin、IRS-1、PI3K蛋白表达水平。结果 ASP促进脂代谢关键酶HSL、LPL、perilipin和DGAT的基因表达。其中0.5mmol/L油酸组增加5倍HSL、1.87倍LPL、6.87倍perilipin、2.5倍DGAT基因表达(P<0.01)。1.0mmol/L油酸组增加3.26倍HSL、2.98倍LPL、5.46倍perilipin、2倍DGAT基因表达(P<0.01)。0.5mmol/L棕榈酸组增加1.98倍HSL、4.63倍DGAT基因表达(P<0.05)。胰岛素和ASP刺激下显著增加脂肪酸孵育的成熟脂肪细胞HSL、perilipin、PI3K蛋白的表达。胰岛素刺激状态下油酸组增加1.75倍HSL、1.27倍perilipin、2.59倍PI3K蛋白的表达(P<0.01),棕榈酸组增加85%(P<0.05)HSL、96%(P<0.05)perilipin、3.66倍(P<0.01)PI3K蛋白的表达。ASP刺激状态下油酸组增加76%(P<0.05)HSL、86%(P<0.05)perilipin蛋白的表达,棕榈酸组增加76%(P<0.05)perilipin、1.27倍(P<0.01)PI3K蛋白表达。胰岛素及ASP刺激下脂肪细胞IRS-1蛋白表达差异无统计学意义。结论胰岛素和ASP可增加脂代谢关键酶HSL、perilipin蛋白及经典胰岛素信号通路PI3K蛋白的表达。ASP可以从不同程度上增加糖脂代谢关键酶HSL、LPL、perilipin和DGAT基因的表达,通过增加这些酶的表达,提高酶的敏感度,参与调节脂肪细胞糖脂代谢。
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