【摘 要】
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目的通过定点突变,构建α干扰素-2bHis^58（IFNα-2bHis^58）,以期获得高效的新型药物分子。方法采用PCR体外定点突变技术,使α干扰素-2b基因的第58位密码子由GAA突变为CAC。将扩
【机 构】
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中国医科大学基础医学院生理学教研室,北京三元基因工程有限公司
【基金项目】
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北京市科技计划重大专项基金资助项目（D0205001040321）
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目的通过定点突变,构建α干扰素-2bHis^58（IFNα-2bHis^58）,以期获得高效的新型药物分子。方法采用PCR体外定点突变技术,使α干扰素-2b基因的第58位密码子由GAA突变为CAC。将扩增片段克隆入pET23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）。表达的IFNα-2bHis^58经包涵体变复性、DEAE层析和CM层析纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定。结果IFNα-2bHis^58主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,IFNα-2bHis^5
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