脑心肌炎病毒pCMV-HA-VP2表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

来源 :西北民族大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：roy1984

【摘要】

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目的:构建脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis Virus,EMCV)衣壳蛋白VP2基因的真核表达载体pCMV-HA-VP2,并在HEK293细胞中表达.方法:提取EMCV的总RNA,RT-PCR扩增VP2基因,酶切

【作者】

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李倩李向茸王兴陇马瑞仙李生军冯若飞

【机构】

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西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃省动物细胞工程技术研究中心,西北民族大学生命科学与工程学院

【出处】

：

西北民族大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2018年3期

【关键词】

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脑心肌炎病毒 VP2基因真核表达载体 HEK293细胞 Encephalomyocarditis virusVP2 geneEukaryotic expres

【基金项目】

：

国家自然基金项目(31460665),2018年中央高校基本科研业务费资金项目(31920180130),教育部“创新团队发展计划”项目(IRT_17R88).

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目的:构建脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis Virus,EMCV)衣壳蛋白VP2基因的真核表达载体pCMV-HA-VP2,并在HEK293细胞中表达.方法:提取EMCV的总RNA,RT-PCR扩增VP2基因,酶切后构建带HA标签的真核表达质粒pCMV-HA-VP2,运用脂质体介导法将其转染至HEK293细胞中,分别进行过表达检测、Western-blotting分析及IFA检测来验证VP2基因的转录及表达情况.结果:重组表达载体pCMV-HA-VP2构建成功,转染至HEK293细胞中

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