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目的:调查湖北省口腔医疗机构橡皮障隔离术的应用现状。方法:采用方便抽样的方法，利用自行设计的问卷调查表对湖北省13个行政区域的1171名口腔从业人员进行橡皮障隔离术的应用现状调查，数据通过SPSS 20.0软件进行统计学分析。结果:回收有效问卷1167份，橡皮障隔离术知识知晓率、信念持有率和行为形成率3个维度的总得分率分别为76.4%、51.3%和34.9%。应用橡皮障隔离术占比最高的治疗项目为根管治疗（81.4%）,治疗牙位占比最高为下颌后牙（84.4%）,单颗牙平均操作时间为3.2 min。71.6%的受访者在临床诊疗过程中使用橡皮障隔离术，平均使用率为32.4%,统计分析表明橡皮障隔离术使用率与地区、医疗机构级别、学历、专业、工作年限、单颗平均操作时间和收费价格有关。影响橡皮障隔离术应用平均综合得分最高的为技术性因素，其次为价格因素，提高橡皮障隔离术的措施中综合得分最高的为调整收费价格。结论:湖北省口腔医疗机构橡皮障隔离术的整体应用水平有待提高，可采取加强橡皮障隔离术的培训和合理调整橡皮障隔离术的收费标准等措施提高橡皮障隔离术的使用率。