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【摘要】 目的 了解一起食物中毒细菌污染情况并进行分析，为卫生监督监测提供依据。方法 对中毒事件中的各个环节进行采样，进行细菌总数、大肠菌群数及潜在病原菌的测定。结果 饼干、玩具、砧板及餐饮具表面菌落总数超标；浅井水大肠菌群超标；物表及剩余食物均未分离出致病菌；107名发病幼儿园儿童，其中60例病儿及老师腹泻物、肛拭子标本进行细菌学检查，分离出6例均为宋内氏志贺氏菌，所有样品均未检出沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌。结论 这起食物中毒，由宋内氏志贺氏菌污染食品而引起。食物中毒事件频发并非偶然，应加强卫生监督和相应技术指导，杜绝此类食物中毒事件的发生。
【关键词】 宋内氏志贺氏菌；食物中毒；检测
文章编号：1004-7484（2013）-12-7054-01
2012年9月16日，在建湖县某镇私立幼儿园，发生一起107名儿童食物中毒事件。中毒经过：9月14日中餐红烧鸡腿和瓜汤，9月15日中餐是炖蛋和瓜汤，9月16日是肉皮烧蛋糕和瓜汤。三天的腰餐都是饼干和白开水。全园276名儿童均在园内吃腰餐，107名患儿有47名在园内吃中餐，占43.93%，12名在园内订奶，占11.21%。9月15日晚9点30分，首发病例以突然发烧39℃以上，伴呕吐、腹泻就医，脓血便，镜检：脓细胞>15、吞噬细胞十，建湖县人民医院诊断为菌痢。以后同样发病患儿相继就医，于16日达高峰，经统计共发病107例（男59例，女48例），中毒率为38.8%，经补充电解质及抗生素治疗，病程4、7天全部治愈。9月16日，60名病儿及老师及食堂工人肛拭子进行细菌学检查，分离出6例均为宋内氏志贺氏菌。患儿年龄3-7岁。主要症状为腹泻、腹痛、发热、排稀水样便或粘液样便症状，呕吐1-4次，少数头晕，外周血中白细胞总数明显增高，在（10.5-25.0）×109/L之间，中性粒细胞74-86%，其他分类无特殊改变。经流行病学调查、现场卫生学调查及实验室检测，证实这起食物中毒事件由宋内氏志贺氏菌引起。检查结果如下。
1 材料与方法
1.1 样品来源 食堂的刀面、砧板、餐、饮具、玩具表面采样10份，均保存于营养肉汤中送检；园内自来水、浅井水样、食用油、腰餐饼干、剩余食物共7份；病人肛拭子60份样品。
1.2 试剂 SC增菌液、GN增菌液、碱性蛋白胨水培养基、SS、WS、4号琼脂、TCBS、EMB、营养琼脂、血平板、高盐三糖铁及肠道杆菌生化管由杭州天和微生物有限公司提供，API20E生化板条为法国梅里埃公司生产，宋内氏志贺氏菌诊断血清购自兰州生物所，以上均在有效期内使用。
1.3 分离方法 1份粪便标本，59份肛拭子标本。将10份标本（每份标本两根棉签）其中一根直接划线接种SS平皿为A1组，再将另一根分别接种SC及GN增菌液中培养为A2组。另一组50份肛拭标本直接接种SC、GN增菌液中增菌为B组。将17份物表及可疑食物标本接种SC、GN增菌液中培养为C组。以上各标本培养物均按肠道致病菌检验步骤进行分离鉴定[1]。
2 结 果
2.1 检验结果 饼干、1份玩具、砧板及小碗、汤匙、小茶杯表面菌落总数超标，浅井水大肠菌群超标，物表及剩余食物均未分离出致病菌。60例病儿及老师腹泻物、肛拭子标本细菌学检查，分离出6例均为宋内氏志贺氏菌（5例幼儿和一名老师），所有样品均未检出沙门菌、副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌。
2.2 细菌鉴定
2.2.1 培养特点 在液体培养基中，呈均匀浑浊生长，没有菌膜，无沉淀。在SS平板上可见较大、扁平、较不透明菌落。挑取可疑菌落接种于3%氯化钠三糖铁斜面，结果为：斜面不变，底层变黄不产气，不产硫化氢。
2.2.2 革兰染色 镜检为革兰阴性无芽胞小杆菌。
2.2.3 噬菌体试验 噬菌体裂解模式：Sh裂解、E裂解。
2.2.4 生化鉴定 生化反应结果：动力、硫化氢、产气、枸橼酸、尿素、苯丙、靛基质、赖氨酸、VP、乳糖、木糖均阴性，鸟氨酸、甘露醇、棉子糖、MR、ONPG阳性。2API 20E生化板条鉴定结果：6份肛拭子标本检出的细菌其生化谱完全一致，均为0104102（id=99.9%，T=0.86）。
2.2.5 血清分型 按卫生防疫细菌检验[2]，将上述分离菌株接种于3%氯化钠营养琼脂斜面培养24h，用志贺氏菌4种多价血清做玻片凝集试验，凝集良好++++，再用单价血清做玻片凝集，宋内氏血清凝集良好。
3 讨 论
由于本起食物中毒患者年龄小，易感性强，发病急聚，许多患儿采样前已用药，6例阳性病例均为用药前标本，用药前标本检出率高，宋内氏志贺氏菌直接划皿检出率高于增菌检出率。这可能在患者急性期的肠道内病原菌大量繁殖而正常菌群受到影響，直接划皿病原菌呈优势生长，挑选病原菌菌落并不难。试验证明GN增菌液对肠道内多数杆菌无明显抑制作用，通过GN增菌肠道内的非致病菌大量繁殖，这些非病原菌运动活泼，争氧性强，而宋内氏菌无动力，所以在增菌液的表面，非病原菌占优势，而在我们划皿时往往挑取增菌液表面生长物接种平板。故非病原菌在平板上呈优势菌落；②直接划皿比通过增菌后划皿的检出结果快近1d。取直接划皿的典型菌落做血清学凝集试验，在6份标本培养后的菌落做血清凝集试验，其凝集出现的时间，颗粒性状等完全一致，说明菌体抗原特征相同。
幼儿园食物中毒屡见不鲜，这次事件中，饼干、玩具、砧板及餐饮具表面菌落总数超标，浅井水大肠菌群超标，其中一名教师检出宋内氏志贺氏菌。建议大力加强卫生知识宣传，重视食品污染和危害，重视教师和炊事人员的培训，炊管人员的自身健康必须达到标准要求，禁止带菌者上岗。制定严格的食品管理制度，严格规范操作。幼儿园室内要通风，地面、桌面、门把手、玩具等物表做好日常消毒[3]。杜绝此类食物中毒事件的发生。
参考文献
[1] 中华人民共和国国际标准.食品卫生检验方法微生物部分[S].北京：中国标准出版社，1994.
[2] 何晓青.卫生防疫细菌检验[M].北京：新华出版社，1989：479-503.
[3] 王丽，夏静.幼儿园预防食物中毒的干预[J].当代医学杂志，2010，（27）：569-570.
【关键词】 宋内氏志贺氏菌；食物中毒；检测
文章编号：1004-7484（2013）-12-7054-01
2012年9月16日，在建湖县某镇私立幼儿园，发生一起107名儿童食物中毒事件。中毒经过：9月14日中餐红烧鸡腿和瓜汤，9月15日中餐是炖蛋和瓜汤，9月16日是肉皮烧蛋糕和瓜汤。三天的腰餐都是饼干和白开水。全园276名儿童均在园内吃腰餐，107名患儿有47名在园内吃中餐，占43.93%，12名在园内订奶，占11.21%。9月15日晚9点30分，首发病例以突然发烧39℃以上，伴呕吐、腹泻就医，脓血便，镜检：脓细胞>15、吞噬细胞十，建湖县人民医院诊断为菌痢。以后同样发病患儿相继就医，于16日达高峰，经统计共发病107例（男59例，女48例），中毒率为38.8%，经补充电解质及抗生素治疗，病程4、7天全部治愈。9月16日，60名病儿及老师及食堂工人肛拭子进行细菌学检查，分离出6例均为宋内氏志贺氏菌。患儿年龄3-7岁。主要症状为腹泻、腹痛、发热、排稀水样便或粘液样便症状，呕吐1-4次，少数头晕，外周血中白细胞总数明显增高，在（10.5-25.0）×109/L之间，中性粒细胞74-86%，其他分类无特殊改变。经流行病学调查、现场卫生学调查及实验室检测，证实这起食物中毒事件由宋内氏志贺氏菌引起。检查结果如下。
1 材料与方法
1.1 样品来源 食堂的刀面、砧板、餐、饮具、玩具表面采样10份，均保存于营养肉汤中送检；园内自来水、浅井水样、食用油、腰餐饼干、剩余食物共7份；病人肛拭子60份样品。
1.2 试剂 SC增菌液、GN增菌液、碱性蛋白胨水培养基、SS、WS、4号琼脂、TCBS、EMB、营养琼脂、血平板、高盐三糖铁及肠道杆菌生化管由杭州天和微生物有限公司提供，API20E生化板条为法国梅里埃公司生产，宋内氏志贺氏菌诊断血清购自兰州生物所，以上均在有效期内使用。
1.3 分离方法 1份粪便标本，59份肛拭子标本。将10份标本（每份标本两根棉签）其中一根直接划线接种SS平皿为A1组，再将另一根分别接种SC及GN增菌液中培养为A2组。另一组50份肛拭标本直接接种SC、GN增菌液中增菌为B组。将17份物表及可疑食物标本接种SC、GN增菌液中培养为C组。以上各标本培养物均按肠道致病菌检验步骤进行分离鉴定[1]。
2 结 果
2.1 检验结果 饼干、1份玩具、砧板及小碗、汤匙、小茶杯表面菌落总数超标，浅井水大肠菌群超标，物表及剩余食物均未分离出致病菌。60例病儿及老师腹泻物、肛拭子标本细菌学检查，分离出6例均为宋内氏志贺氏菌（5例幼儿和一名老师），所有样品均未检出沙门菌、副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌。
2.2 细菌鉴定
2.2.1 培养特点 在液体培养基中，呈均匀浑浊生长，没有菌膜，无沉淀。在SS平板上可见较大、扁平、较不透明菌落。挑取可疑菌落接种于3%氯化钠三糖铁斜面，结果为：斜面不变，底层变黄不产气，不产硫化氢。
2.2.2 革兰染色 镜检为革兰阴性无芽胞小杆菌。
2.2.3 噬菌体试验 噬菌体裂解模式：Sh裂解、E裂解。
2.2.4 生化鉴定 生化反应结果：动力、硫化氢、产气、枸橼酸、尿素、苯丙、靛基质、赖氨酸、VP、乳糖、木糖均阴性，鸟氨酸、甘露醇、棉子糖、MR、ONPG阳性。2API 20E生化板条鉴定结果：6份肛拭子标本检出的细菌其生化谱完全一致，均为0104102（id=99.9%，T=0.86）。
2.2.5 血清分型 按卫生防疫细菌检验[2]，将上述分离菌株接种于3%氯化钠营养琼脂斜面培养24h，用志贺氏菌4种多价血清做玻片凝集试验，凝集良好++++，再用单价血清做玻片凝集，宋内氏血清凝集良好。
3 讨 论
由于本起食物中毒患者年龄小，易感性强，发病急聚，许多患儿采样前已用药，6例阳性病例均为用药前标本，用药前标本检出率高，宋内氏志贺氏菌直接划皿检出率高于增菌检出率。这可能在患者急性期的肠道内病原菌大量繁殖而正常菌群受到影響，直接划皿病原菌呈优势生长，挑选病原菌菌落并不难。试验证明GN增菌液对肠道内多数杆菌无明显抑制作用，通过GN增菌肠道内的非致病菌大量繁殖，这些非病原菌运动活泼，争氧性强，而宋内氏菌无动力，所以在增菌液的表面，非病原菌占优势，而在我们划皿时往往挑取增菌液表面生长物接种平板。故非病原菌在平板上呈优势菌落；②直接划皿比通过增菌后划皿的检出结果快近1d。取直接划皿的典型菌落做血清学凝集试验，在6份标本培养后的菌落做血清凝集试验，其凝集出现的时间，颗粒性状等完全一致，说明菌体抗原特征相同。
幼儿园食物中毒屡见不鲜，这次事件中，饼干、玩具、砧板及餐饮具表面菌落总数超标，浅井水大肠菌群超标，其中一名教师检出宋内氏志贺氏菌。建议大力加强卫生知识宣传，重视食品污染和危害，重视教师和炊事人员的培训，炊管人员的自身健康必须达到标准要求，禁止带菌者上岗。制定严格的食品管理制度，严格规范操作。幼儿园室内要通风，地面、桌面、门把手、玩具等物表做好日常消毒[3]。杜绝此类食物中毒事件的发生。
参考文献
[1] 中华人民共和国国际标准.食品卫生检验方法微生物部分[S].北京：中国标准出版社，1994.
[2] 何晓青.卫生防疫细菌检验[M].北京：新华出版社，1989：479-503.
[3] 王丽，夏静.幼儿园预防食物中毒的干预[J].当代医学杂志，2010，（27）：569-570.