【摘 要】
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目的建立一种荧光多聚酶链反应测定线粒体乙醛脱氢酶-2 Glu504Lys 多态性的方法。方法以水解探针技术（TaqMan）为基础,设计相应的引物和荧光探针,PCR 反应的 Mg2+浓度和探针浓度
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目的建立一种荧光多聚酶链反应测定线粒体乙醛脱氢酶-2 Glu504Lys 多态性的方法。方法以水解探针技术（TaqMan）为基础,设计相应的引物和荧光探针,PCR 反应的 Mg2+浓度和探针浓度进行优化,同时对本方法的灵敏度和精密度进行了研究,通过 PCR 产物直接测序对准确度进行评价。结果优化后的 Mg2+和探针浓度分别为2.5 mmol/L和1.0 μmol/L,批内循环阈值（Ct）值的变异系数为1.38%（n=20）,批间 Ct 值的变异系数为1.48%（n=20）;在25μl反应体系中,人基因组 DNA 在5.0×102～5.0×106 pg 浓度范围内可以得到满意的结果。本法确定150份标本的基因型与 PCR 产物直接测序法比较,结果完全一致。结论本方法快速、灵敏、可靠,适合于临床实验室和大规模测定线粒体乙醛脱氢酶-2Glu504Lys 多态性。
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