【摘 要】
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目的观察猪带绦虫重组质粒pMG36e-TSOL18和pMG36e-SP-TSOL18在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)中的表达情况。方法将胞内型表达载体pMG36e-TSOL18和分泌型表达载体pMG36e-SP-
【基金项目】
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贵州省优秀青年科技人才基金项目(No.黔科合平台人才[2017]5629);贵州省卫计委科研项目(No.gzwjkj2016-1-048);省市科技合作专项资金向目(No.省市科合201552)
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目的观察猪带绦虫重组质粒pMG36e-TSOL18和pMG36e-SP-TSOL18在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)中的表达情况。方法将胞内型表达载体pMG36e-TSOL18和分泌型表达载体pMG36e-SP-TSOL18电穿孔转化至L.lactis MG1363,PCR鉴定阳性克隆,经热诱导后采用SDS-PAGE和Western blot分析表达情况。结果 PCR鉴定重组质粒pMG36e-TSOL18和pMG36e-SP-TSOL18成功转入L.lactis MG1363。SDS-PAGE检测重组质粒pMG36eTSOL18转化菌仅在胞内表达相对分子质量(Mr)约为15×103的TSOL18目的蛋白,pMG36e-SP--TSOL18转化菌胞内和胞外均表达相应的TSOL18目的蛋白,其相对分子质量(Mr)为15×10~3,与预期相符;Western blot分析重组pMG36e-TSOL18/L.lactis胞内表达的TSOL18重组蛋白以及pMG36e-SP-TSOL18/L.lactis胞内和胞外表达的TSOL18重组蛋白均能被相应兔抗血清识别。结论猪带绦虫重组质粒pMG36e-TSOL18转化L.lactis MG1363后仅在胞内表达TSOL18蛋白,pMG36e-SP-TSOL18转化L.lactis MG1363后胞内胞外均有TSOL18蛋白表达,但产量较低,表达的重组蛋白均具有免疫反应性。
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