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【摘要】目的：探讨Her-2/neu和MMP-2在胃癌中和癌灶远隔胃癌组织中的表达情况，分析Her-2/neu和MMP-2与胃癌的临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组化染色方法研究Her-2/neu和MMP-2在胃癌组织和癌灶远隔胃组织的表达情况，并分析Her-2/neu和MMP-2与胃癌临床病理特征之间的关系。结果：胃癌组织中Her-2/neu、MMP-2表达阳性率明显高于对照组（P<0.05）；胃癌组织中的Her-2/neu和MMP-2的表达与胃癌细胞的淋巴结转移、TNM分期密切相关（P<0.05）；Her-2/neu与MMP-2在胃癌组织中的表达呈显著正相关（P<0.05）。结论：Her-2/neu和MMP-2在胃癌组织中高表达与胃癌的发生发展密切相关，可作为胃癌分子生物治疗的理想靶点，联合检测Her-2/neu和MMP-2的表达，对指导胃癌的分子靶向治疗及患者预后的评估具有重要意义。
【关键词】Her-2/neu；MMP-2；胃癌
The study of Her-2/neu and MMP-2 expression and its clinical value in gastric carcinoma
【Abstract】Objective: This study was designed to investigate the protein expression of HER-2/neu and MMP-2 in gastric carcinoma, to intend and analyse relationship of HER-2/neu and MMP-2 with various clinicopathological. Method: In this study, immunohistochemical methods were used to investigate the protein expression of HER-2/neu and MMP-2 in gastric carcinoma and tumor-free gastric tissues. Results: HER-2/neu and MMP-2 positive stained in gastric carcinoma were significantly higher thantumor-free gastric tissues (P<0.05). The expression of HER-2/neu and MMP-2 in gastric carcinoma was closely related to TNM stages, lympha node metastasis (P<0.05). There were close compatibility among HER-2/neu and MMP-2 in gastric carcinoma (P<0.05). Conclusion: Her-2/neu and MMP-2 were higmy expressed in gastric carcinoma tissue and were associated with the occurrence and development of gatric carcinoma，they can be used as the ideal targets for molecular biology treatment of gastric carcinoma.
【Key words】Her-2/neu; MMP-2; Gastric carcinoma
本研究应用免疫组织化学技术，检测Her-2/neu、MMP-2在胃癌组织中的表达情况，分析二者在胃癌发生发展中的作用、相互关系及其与胃癌临床病理特征之间的关系，探讨Her-2/neu、MMP-2作为胃癌分子生物靶点治疗胃癌的可行性，为胃癌患者寻求新的综合治疗途径提供理论参考。
1资料与方法
1.1一般资料2009年2月~2010年2月选择在我院接受普通外科手术切除的胃癌组织标本62例，其中男44例，女18例；年龄42~77岁，平均年龄（59.86±15.64）岁；术前均未任何抗肿瘤治疗。另外，从以上病例中随机选取30例距癌组织边缘5cm以上的并经病理证实无肿瘤细胞的正常胃组织作为对照组。所有标本均经10％中性甲醛固定，常规石蜡包埋。
1.2方法（1）免疫组化方法：采用EliVisionTM二步法，EliVisionTM试剂盒和兔抗人HER-2、MMP-2单克隆抗体均购自福州迈新生物技术公司。采用已知阳性切片作为阳性对照，以PBS代替一抗作为空白对照[1]。（2）结果判定：Her-2/neu基因表达产物和MMP-2表达阳性细胞率≥10%判断为阳性（+），未见黄染颗粒的细胞或者无论染色深浅每高倍镜视野细胞阳性率<10%为阴性细胞[2]。
1.3统计学处理采用SPSSl3.0软件进行统计分析。其中定性资料的比较使用x2检验或Fisher’s精确概率法，相关性分析采用Spearman等级相关分析，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1胃癌组织中Her-2/neu、MMP-2表达情况62例胃癌组织中Her-2/neu（24.19%）、MMP-2（58.06%）表达阳性率明显高于对照组(0.00%、23.33%)，且差异具有统计学意义（x2=8.35、9.72，P均<0.05）。
2.2胃癌组织中Her-2/neu和MMP-2的表达与其临床病理资料之间的关系Her-2/neu在胃癌组织中有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的阳性表达率的差异有显著性，MMP-2在胃癌组织中有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的阳性表达率的差异有显著性，且差异具有统计学意义（x2=5.01、4.87，P均<0.05）。在胃癌的不同TNM分期中，Her-2/neu在胃癌组织TNM I+II期和III+IV期的阳性表达率的差异有显著性，且差异具有统计学意义（x2=5.65、11.28，P均<0.05）。具体见表1和表2。
表1 Her-2/neu与肿瘤患者其他临床病理特征的关系 [例（%）]
表2 MMP-2与肿瘤患者其他临床病理特征的关系 [例（%）]
2.3Her-2/neu和MMP-2在胃癌组织中表达的相关性经Spearman等级相关分析Her-2/neu与MMP-2在胃癌组织中的表达呈显著正相关（r =0.253，P<0.05）。
3讨论
胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤，是严重危害全世界人民健康的疾病之一，发病率占我国消化道恶性肿瘤的首位。近年来，随着分子生物学的发展，分子靶向治疗成为目前肿瘤治疗领域发展的新方向，如能探寻出胃癌中的新靶点，那么分子靶向治疗有望成为进展期胃癌治疗的新手段[3]。研究表明：中国人胃癌组织人类表皮生长因子受体2（human epidermalgrowth factor receptor-2，Her2/neu）表达率在20%左右，高表达Her2/neu与患者不良预后相关[4]。还有研究显示，胃癌组织中金属基质蛋白酶2（Human Matrix Metalloproteinases 2，MMP2）表达与胃癌的浸润深度、远处转移、淋巴结转移及临床分期密切相关 。本研究应用免疫组织化学技术，检测Her-2/neu、MMP-2在胃癌组织中的表达情况，分析二者在胃癌发生发展中的作用、相互关系及其与胃癌临床病理特征之间的关系，结果发现62例胃癌组织中Her-2/neu、MMP-2表达阳性率明显高于对照组，且差异具有统计学意义（x2=8.35、9.72，P均<0.05）。Her-2/neu在胃癌组织中有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的阳性表达率的差异有显著性，MMP-2在胃癌组织中有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的阳性表达率的差异有显著性，且差异具有统计学意义（x2=5.01、4.87，P均<0.05）。在胃癌的不同TNM分期中，Her-2/neu在胃癌组织TNM I+II期和III+IV期的阳性表达率的差异有显著性，且差异具有统计学意义（x2=5.65、11.28，P均<0.05）。经Spearman等级相关分析显示，Her-2/neu与MMP-2在胃癌组织中的表达呈显著正相关（r =0.253，P<0.05）。
参考文献
[1] Bao W, Fu HJ, Jia LT, et al. HER2-mediated upregulation of MMP-1 is involved in gastric cancer cell invasion [J]. Arch Biochem Biophys, 2010, 499(1-2): 49-55.
[2] 奚文崎，张本炎，金晓龙，等.198例胃癌手术标本Her-2蛋白表达与临床病理的相关性和靶向治疗[J].中国癌症杂志，2010，20（12）：897-902.
[3] Zhang YJ, Fang JY. Molecular staging of gastric cancer [J]. J Gastroenterol Hepatol, 2008, 23(6): 856-860.
[4] Fuse N. Relation of HER2 status and prognosis in gastric cancer patients [J]. Gan To Kagaku Ryoho, 2011, 38(7): 1073-1078.
【关键词】Her-2/neu；MMP-2；胃癌
The study of Her-2/neu and MMP-2 expression and its clinical value in gastric carcinoma
【Abstract】Objective: This study was designed to investigate the protein expression of HER-2/neu and MMP-2 in gastric carcinoma, to intend and analyse relationship of HER-2/neu and MMP-2 with various clinicopathological. Method: In this study, immunohistochemical methods were used to investigate the protein expression of HER-2/neu and MMP-2 in gastric carcinoma and tumor-free gastric tissues. Results: HER-2/neu and MMP-2 positive stained in gastric carcinoma were significantly higher thantumor-free gastric tissues (P<0.05). The expression of HER-2/neu and MMP-2 in gastric carcinoma was closely related to TNM stages, lympha node metastasis (P<0.05). There were close compatibility among HER-2/neu and MMP-2 in gastric carcinoma (P<0.05). Conclusion: Her-2/neu and MMP-2 were higmy expressed in gastric carcinoma tissue and were associated with the occurrence and development of gatric carcinoma，they can be used as the ideal targets for molecular biology treatment of gastric carcinoma.
【Key words】Her-2/neu; MMP-2; Gastric carcinoma
本研究应用免疫组织化学技术，检测Her-2/neu、MMP-2在胃癌组织中的表达情况，分析二者在胃癌发生发展中的作用、相互关系及其与胃癌临床病理特征之间的关系，探讨Her-2/neu、MMP-2作为胃癌分子生物靶点治疗胃癌的可行性，为胃癌患者寻求新的综合治疗途径提供理论参考。
1资料与方法
1.1一般资料2009年2月~2010年2月选择在我院接受普通外科手术切除的胃癌组织标本62例，其中男44例，女18例；年龄42~77岁，平均年龄（59.86±15.64）岁；术前均未任何抗肿瘤治疗。另外，从以上病例中随机选取30例距癌组织边缘5cm以上的并经病理证实无肿瘤细胞的正常胃组织作为对照组。所有标本均经10％中性甲醛固定，常规石蜡包埋。
1.2方法（1）免疫组化方法：采用EliVisionTM二步法，EliVisionTM试剂盒和兔抗人HER-2、MMP-2单克隆抗体均购自福州迈新生物技术公司。采用已知阳性切片作为阳性对照，以PBS代替一抗作为空白对照[1]。（2）结果判定：Her-2/neu基因表达产物和MMP-2表达阳性细胞率≥10%判断为阳性（+），未见黄染颗粒的细胞或者无论染色深浅每高倍镜视野细胞阳性率<10%为阴性细胞[2]。
1.3统计学处理采用SPSSl3.0软件进行统计分析。其中定性资料的比较使用x2检验或Fisher’s精确概率法，相关性分析采用Spearman等级相关分析，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1胃癌组织中Her-2/neu、MMP-2表达情况62例胃癌组织中Her-2/neu（24.19%）、MMP-2（58.06%）表达阳性率明显高于对照组(0.00%、23.33%)，且差异具有统计学意义（x2=8.35、9.72，P均<0.05）。
2.2胃癌组织中Her-2/neu和MMP-2的表达与其临床病理资料之间的关系Her-2/neu在胃癌组织中有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的阳性表达率的差异有显著性，MMP-2在胃癌组织中有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的阳性表达率的差异有显著性，且差异具有统计学意义（x2=5.01、4.87，P均<0.05）。在胃癌的不同TNM分期中，Her-2/neu在胃癌组织TNM I+II期和III+IV期的阳性表达率的差异有显著性，且差异具有统计学意义（x2=5.65、11.28，P均<0.05）。具体见表1和表2。
表1 Her-2/neu与肿瘤患者其他临床病理特征的关系 [例（%）]
表2 MMP-2与肿瘤患者其他临床病理特征的关系 [例（%）]
2.3Her-2/neu和MMP-2在胃癌组织中表达的相关性经Spearman等级相关分析Her-2/neu与MMP-2在胃癌组织中的表达呈显著正相关（r =0.253，P<0.05）。
3讨论
胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤，是严重危害全世界人民健康的疾病之一，发病率占我国消化道恶性肿瘤的首位。近年来，随着分子生物学的发展，分子靶向治疗成为目前肿瘤治疗领域发展的新方向，如能探寻出胃癌中的新靶点，那么分子靶向治疗有望成为进展期胃癌治疗的新手段[3]。研究表明：中国人胃癌组织人类表皮生长因子受体2（human epidermalgrowth factor receptor-2，Her2/neu）表达率在20%左右，高表达Her2/neu与患者不良预后相关[4]。还有研究显示，胃癌组织中金属基质蛋白酶2（Human Matrix Metalloproteinases 2，MMP2）表达与胃癌的浸润深度、远处转移、淋巴结转移及临床分期密切相关 。本研究应用免疫组织化学技术，检测Her-2/neu、MMP-2在胃癌组织中的表达情况，分析二者在胃癌发生发展中的作用、相互关系及其与胃癌临床病理特征之间的关系，结果发现62例胃癌组织中Her-2/neu、MMP-2表达阳性率明显高于对照组，且差异具有统计学意义（x2=8.35、9.72，P均<0.05）。Her-2/neu在胃癌组织中有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的阳性表达率的差异有显著性，MMP-2在胃癌组织中有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的阳性表达率的差异有显著性，且差异具有统计学意义（x2=5.01、4.87，P均<0.05）。在胃癌的不同TNM分期中，Her-2/neu在胃癌组织TNM I+II期和III+IV期的阳性表达率的差异有显著性，且差异具有统计学意义（x2=5.65、11.28，P均<0.05）。经Spearman等级相关分析显示，Her-2/neu与MMP-2在胃癌组织中的表达呈显著正相关（r =0.253，P<0.05）。
参考文献
[1] Bao W, Fu HJ, Jia LT, et al. HER2-mediated upregulation of MMP-1 is involved in gastric cancer cell invasion [J]. Arch Biochem Biophys, 2010, 499(1-2): 49-55.
[2] 奚文崎，张本炎，金晓龙，等.198例胃癌手术标本Her-2蛋白表达与临床病理的相关性和靶向治疗[J].中国癌症杂志，2010，20（12）：897-902.
[3] Zhang YJ, Fang JY. Molecular staging of gastric cancer [J]. J Gastroenterol Hepatol, 2008, 23(6): 856-860.
[4] Fuse N. Relation of HER2 status and prognosis in gastric cancer patients [J]. Gan To Kagaku Ryoho, 2011, 38(7): 1073-1078.