用毕赤酵母的GAP启动子调控表达L-阿拉伯糖异构酶

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应用PCR从大肠杆菌基因组中扩增L-阿拉伯糖异构酶基因,用EcoR I和Not I双酶切将其克隆进P.pastoris表达载体,获得重组表达载体pGAP9K—L-ai。通过电转法将pGAP9K—L—ai转化毕赤酵母GS115,筛选高G418抗性和高表达L一阿拉伯糖异构酶的重组工程菌。用葡萄糖作为碳源在摇瓶中发酵48h,表达重组L-ai53mg/L。用毕赤酵母的GAP启动子调控表达的重组L-ai具有异构D-半乳糖生成D.塔格糖的生物学活性。
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