【摘 要】
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利用PCR技术以纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因,将该基因克隆到温度诱导型表达载体pBV220上,转化E.coli HB101,获得转纳豆激酶基因重组菌.在确定了其最佳培养时间与
【机 构】
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华南理工大学食品与生物工程学院,深圳职业技术学院生物应用工程系
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利用PCR技术以纳豆杆菌染色体DNA为模板扩增纳豆激酶基因,将该基因克隆到温度诱导型表达载体pBV220上,转化E.coli HB101,获得转纳豆激酶基因重组菌.在确定了其最佳培养时间与诱导时间后,SDS-PAGE分析结果表明基因表达产物为分泌型,蛋白表达量占菌体蛋白的12%左右,液体发酵后纳豆激酶产量可达120U/mL菌液.对重组菌中重组质粒的稳定性进行研究,结果表明该质粒在宿主菌中具有良好的分离稳定性,而结构稳定性较差.
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