论文部分内容阅读
摘要 目的：探索蛋黄馏油中纳米类成分治疗湿疹的作用及其机制。方法：蛋黄馏油经过水萃取，得到富含纳米类成分的蛋黄馏油水溶液（EYO-CDs）。利用2，4-二硝基氯苯乙醇溶液建立小鼠慢性湿疹模型，以复方醋酸地塞米松乳膏为阳性对照，评价EYO-CDs治疗湿疹的作用及机制。结果：EYO-CDs能减轻慢性湿疹小鼠耳肿胀度，降低血清及组织中白细胞介素-4（IL-4），白细胞介素-17（IL-17）及升高γ干扰素（INF-γ）水平。HE染色结果显示，给药后耳组织表皮角化、水肿、淋巴细胞浸润、真皮血管扩张充血等病理现象均有不同程度缓解。治疗效果与给药浓度具有一定的量效关系。结论：蛋黄馏油中的EYO-CDs对小鼠慢性湿疹具有治疗作用，主要通过抑制炎症介质，调节免疫因子起效，为临床推广应用提供了实验依据。
关键词 蛋黄馏油;炭点;蛋黄馏油水溶液;表征;湿疹;白细胞介素-4;白细胞介素-17;γ干扰素
Abstract Objective：To explore the effect and mechanism of nano-components in distilled egg yolk in the treatment of eczema.Methods：Distillate egg yolk was extracted with water to obtain an aqueous solution of distilled egg yolk（EYO-CDs） rich in nano-components.A mouse model of chronic eczema was established with 2，4-dinitrochlorobenzene alcohol solution，and the compound dexamethasone acetate cream was used as a positive control to evaluate the action and mechanism of EYO-CDs in the treatment of eczema.Results：EYO-CDs can reduce ear swelling in mice with chronic eczema，reduce interleukin-4（IL-4），interleukin-17（IL-17） and increase interferon-γ（INF-γ） in serum and tissues.The results of HE staining showed that pathological phenomena such as epidermal keratosis，edema，lymphocyte infiltration，dermal vasodilation and congestion in ear tissues were relieved to varying degrees after administration.The therapeutic effect has a certain dose-effect relationship with the administration concentration.Conclusion：EYO-CDs in distilled egg yolk has a therapeutic effect on chronic eczema in mice，mainly by inhibiting inflammatory factors and regulating immune factors，providing experimental evidence for clinical application.
Keywords Egg yolk oil; Carbon dots; EYO-CDs; Characterization; Eczema; IL-4; IL-17; INF-γ
中圖分类号：R284;R751文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.20.008
湿疹是一种常见的过敏性炎症性皮肤病，近年来发病率急剧增高，占皮肤科门诊病例的15%～30%[1]，发病人群广，可发于任何年龄性别，发病部位不一，甚至全身发病。其主要特点呈现为剧烈瘙痒，呈现多种形态的皮损，具有渗出倾向，急性与慢性反复发作，容易慢性化[2]。因其发病机制复杂，内在因素与外在因素相互作用是诱发本病的主要原因。治疗湿疹多用抗组胺药，激素类药物等，虽短期内可改善瘙痒和皮损症状，但是停药后容易复发，或产生耐药现象导致复发，长期使用易造成毛细血管扩张、皮肤萎缩、色素沉着等[3]。
湿疹在中医学属于“湿疮”“浸淫疮”等范畴。中医治疗湿疹具有悠久的历史，积累了丰富的临床经验，不仅能有效改善湿疹症状，而且降低复发率，治疗宜内外兼顾，然而中药外用散剂或霜剂、软膏等种类还不够丰富，因此开发使用方便、疗效显著、无不良反应、安全性高的中药外用制剂能够为临床提供一种新的选择。
蛋黄油为雉科动物家鸡鲜卵的卵黄提取物[4]，主要含有卵磷脂、脂肪酸、胆固醇、叶酸、胡萝卜素、钙、磷、铁等多种药用和营养成分[5]。现代临床实验证明蛋黄馏油具有保护和营养皮肤黏膜，促进创面愈合的作用，可治疗多种皮肤和黏膜疾病[6]。传统的蛋黄馏油是用干馏法制备而得，其工艺简单但是难以去除毒性致癌物苯并[α]芘和强烈的焦臭味，制约了临床应用，本课题组前期研究发现蛋黄馏油中含有纳米类成分[7]。为探索蛋黄馏油纳米类成分是否为治疗湿疹的物质基础。本实验用萃取法得到蛋黄馏油水溶性成分，并对萃取液中碳纳米类成分（EYO-CDs）进行表征，通过建立小鼠慢性湿疹模型，观察EYO-CDs对慢性湿疹小鼠的治疗作用，检测血清及皮肤组织中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-17（IL-17）和γ干扰素（IFN-γ）的含量变化，为研究蛋黄馏油治疗湿疹的物质基础打开了新视野。 2.2 EYO-CDs对慢性湿疹小鼠右耳部厚度和重量的影响
与空白组比较，模型组小鼠右耳肿胀厚度及重量明显增加（P<0.01），提示小鼠湿疹实验模型造模成功。经过4次给药后，阳性药组与模型组比较，小鼠的右耳肿胀厚度及重量均有明显的降低，EYO-CDs各剂量组与模型组比较，小鼠的右耳肿胀厚度及重量也都有不同程度的降低，且存在一定的量效关系，浓度越高耳肿胀厚度及耳重量减轻的效果越好。与模型组比较，各组差异均有统计学意义（均P<0.05或P<0.01）。与阳性药组比较，EYO-CDs低剂量组耳重量大于阳性药组（P<0.05）。EYO-CDs低剂量组和中剂量组耳厚度大于阳性药组（P<0.05）。EYO-CDs高剂量组与阳性药组差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。
2.3 EYO-CDs对慢性湿疹小鼠耳组织病理学变化的影响
空白组小鼠耳部组织结构正常，表皮厚度正常，无水肿，无明显淋巴细胞浸润，血管形态正常。慢性湿疹模型组小鼠耳部表皮坏死，颗粒层增厚，棘层增厚，细胞内及细胞间水肿，真皮大量炎症细胞，淋巴细胞浸润，真皮血管扩张充血明显。阳性药物组小鼠表皮结构正常，略有角化，表皮及真皮水肿明显减轻，炎症细胞明显减少。EYO-CDs低剂量组表皮角化稍有减轻，水肿及炎症细胞浸润稍有减少，EYO-CDs中剂量组表皮角化减轻，结构清晰，炎症介质明显减少，稍有水肿。EYO-CDs高剂量组耳组织表皮结构正常，角化减轻明显，水肿、淋巴细胞浸润大量减少、增厚程度减少明显，血管形态正常。见图2。
2.4 各组小鼠血清中IL-4、IFN-γ含量比较
与空白组比较，模型组小鼠血清中IL-4含量明显升高，IFN-γ含量明显降低（P<0.01）。与模型组比较，阳性药组、EYO-CDs各剂量组小鼠血清中IL-4含量均有不同程度降低（P<0.01），与模型组比较，阳性药组、EYO-CDs中、高剂量组IFN-γ含量均有不同程度的提高（P<0.01），低剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。与各处理组比较，EYO-CDs高中低剂量组小鼠血清中IL-4含量高于阳性药组，IFN-γ含量均低于阳性药组（P<0.01），EYO-CDs组浓度越高，IL-4降低与IFN-γ升高程度越大。与阳性药组比较，EYO-CDs低中浓度IL-4、INF-γ差异均有统计学意义（均P<0.01），EYO-CDs高剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。
2.5 各组小鼠耳组织中IL-4、IL-17含量比较
与空白组比较，模型组小鼠耳组织中IL-4和IL-17含量明显升高（P<0.01）。与模型组比较，各给药组IL-4，IL-17均有不同程度降低，阳性药组IL-4，IL-17含量最低，EYO-CDs各剂量组随着药物浓度的升高，小鼠耳组織中IL-4和IL-17含量降低（P<0.01或P<0.05）。与阳性药组比较，EYO-CDs低中剂量组IL-4、IL-17差异有统计学意义（P<0.01），EYO-CDs高剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。见表3。
3 讨论
蛋黄油也被称为“凤凰油”“鸡蛋油”“鸡卵油”“鸡子油”等[10]。蛋黄油最早出自北周姚僧垣的《集验方》，治汤火烧疮方，第一次确切的指出蛋黄油具有治烫伤，敛疮祛瘢痕的效果。此后便广泛地运用于治疗疮癣、烧烫伤、皮肤瘙痒等皮肤病。研究表明蛋黄馏油具有促进创面愈合，抗氧化，降血脂[11]，促进血管内皮生长因子表达等功效[12]。并且制作工艺简单，安全性高，不仅被运用于治疗胃溃疡，心悸，小儿百日咳等多种疾病[13]，更多用于治疗湿疹，烧烫伤，乳头皲裂等疾病。基于目前多集中于临床报道，药理药效研究不够深入，本课题组前期通过对蛋黄馏油萃取、透析，发现蛋黄馏油中含有碳点EYO-CDs。本实验通过对蛋黄馏油萃取液进行重新表征，分别利用低分辨和高分辨电镜观察其微观结构，紫外光谱及荧光光谱显示有荧光现象，验证了蛋黄馏油萃取液中EYO-CDs的存在。EYO-CDs粒径分布在1～2.8 nm之间，近似球形，晶格清晰，晶格间距为0.291 nm。荧光光谱最大激发波长为354 nm，最大发射波长为439 nm。前期研究结果：EYO-CDs粒径分布评价小于10 nm，近似球形，晶格清晰，晶格间距为0.267 nm。荧光光谱最大激发波长为366 nm，最大发射波长为450 nm。本研究中EYO-CDs与前期研究制备的EYO-CDs差异不大，重复性良好，说明本实验室对炭药的制备具有稳定性。蛋黄馏油中含有致癌物苯并（α）芘，且具有难闻的气味，制约了其制剂的发展和应用，本实验通过水萃取法可以有效去除苯并（α）芘及难闻的气味。
对于湿疹的发病机制尚未完全明确，普遍认为与炎症感染，遗传和环境因素有关[14-15]。目前研究发现，IL-4，IL-17等炎症介质的增加是慢性湿疹重要发病机制之一[16]。INF-γ等淋巴因子的分泌是减少变态反应，治疗湿疹的方法之一。Th1细胞分泌INF-γ可抑制Th2细胞所分泌的IL-4等炎症介质[17]。Th1占优势时预后良好，Th2占优势时预后不良，二者是相互制衡的关系[18]。IL-17在湿疹的病理生理学上发挥着至关重要的作用，在湿疹的急性期和复发期其明显升高，可能是湿疹的持续和加剧的因素之一[19]。本研究结果显示EYO-CDs能有效下调慢性湿疹小鼠血清及耳组织中IL-4水平，上调INF-γ水平，促进Th1增殖，抑制Th2的分泌，使Th1与Th2达到动态平衡，从而抑制炎症介质的表达，降低炎症反应。慢性湿疹模型小鼠耳组织中EYO-CDs组IL-17含量明显下降，说明EYO-CDs对湿疹模型小鼠IL-17的表达有明显的抑制作用。实验结果显示，小鼠耳组织中IL-4的含量明显高于血清中IL-4的含量，血清中IL-17含量低于试剂盒检测最低值，由此可以看出耳组织中IL-4与IL-17均高于血清中的含量，IL-4、IL-17在局部病变组织、血液中表达量不同[20]。HE染色结果显示，给药后耳组织表皮角化、水肿、淋巴细胞浸润、血管充血等病理现象均有不同程度缓解。治疗效果与给药浓度具有一定的量效关系。 综上所述，本研究对EYO-CDs进行表征，通过小鼠湿疹模型发现EYO-CDs是通过下调IL-4、IL-17，上调INF-γ，调节Th1与Th2的平衡，抑制炎症介质的表达，调节免疫因子，从而达到治疗慢性湿疹的作用，过萃取去除其中致癌物苯并[α]芘，增加了其安全性，并去除其难闻的气味。
参考文献
[1]娄方璐，刁庆春，刘毅，等.湿疹中医外治处方用药规律分析[J].陕西中医，2012，33（1）：97-100.
[2]北京醫学院，上海第一医学院.皮肤病学[M].北京：人民卫生出版社，1980：53.
[3]赵淑英，余嘉璇，袁启航.参柏洗液治疗皮炎湿疹的临床研究[J].中国新药杂志，2020，29（5）：547-549.
[4]湖南省食品药品监督管理局.湖南省中药材标准：2009年版[S].长沙：湖南科学技术出版社，2010：50-51.
[5]陈伊凡，唐宏刚，李欢欢，等.蛋黄油的提取及其氧化产物挥发性成分分析[J].核农学报，2020，34（11）：2499-2506.
[6]杨希良，赵青剑，景箫，等.醇提蛋黄油对胃粘膜损伤的辅助保护功能评价[J].食品安全质量检测学报，2019，10（22）：7502-7508.
[7]Zhao Y，Zhang Y，Liu X，et al.Novel carbon quantum dots from egg yolk oil and their haemostatic effects[J].Sci Rep，2017，7（1）：4452.
[8]李仪奎.中药药理实验方法学[M].2版.上海：科学技术出版社，2006：875-876.
[9]韩佳柳，林华，刘玉柱，等.苯并芘分子构型和特征光谱的研究[J].科技创新与应用，2016，6（17）：72.
[10]申海明，韩丽庭.蛋黄油在内科疾病治疗中应用[J].实用中医内科杂志，1998，12（2）：3-5.
[11]Wu P，Pan Y，Yan J，et al.Assessment of Egg Yolk Oil Extraction Methods of for ShiZhenKang Oil by Pharmacodynamic Index Evaluation[J].Molecules，2016，21（1）：E106.
[12]危红，李泽华，夏文维，等.蛋黄油在中医外科中的应用现状及展望[J].中国民族民间医药，2018，27（23）：76-79.
[13]包金燕.蛋黄油在内科疾病治疗中的应用[J].临床医药文献（连续型电子期刊），2016，3（56）：11204.
[14]廖理超，胡白，张思平，等.食物不耐受与慢性湿疹相关性的研究[J].皮肤性病诊疗学杂志，2018，25（3）：145-148.
[15]余志杰，邓婷，李劲松，等.蛇黄软膏对湿疹的抗过敏、止痒及抗炎作用研究[J].中国新药杂志，2020，29（16）：1868-1876.
[16]蔚志仁，石晶，王彩霞，等.参苓白术散加减治疗脾虚湿蕴型亚急性湿疹临床疗效及对炎症因子和外周血T淋巴细胞亚群的影响[J].中国实验方剂学杂志，2019，25（5）：63-67.
[17]李孜怡.金雀凉血解毒颗粒对大鼠湿疹模型免疫调节作用机制研究[D].哈尔滨：黑龙江中医药大学，2018.
[18]曹雪涛.医学免疫学[M].6版.北京：人民卫生出版社.2013：90-91，110-113，145-147.
[19]Souwer Y，Szegedi K，Kapsenberg ML，et al.IL-17 and IL-22 in atopic allergic disease[J].Curr Opin Immunol，2010，22（6）：821-826.
[20]李春联，王学民.DNCB诱发小鼠耳肿胀与组织内IL-4和IFN-γ的相关性[J].中国皮肤性病学杂志，2013，27（7）：667-669.
（2020-11-10收稿 责任编辑：杨觉雄）
关键词 蛋黄馏油;炭点;蛋黄馏油水溶液;表征;湿疹;白细胞介素-4;白细胞介素-17;γ干扰素
Abstract Objective：To explore the effect and mechanism of nano-components in distilled egg yolk in the treatment of eczema.Methods：Distillate egg yolk was extracted with water to obtain an aqueous solution of distilled egg yolk（EYO-CDs） rich in nano-components.A mouse model of chronic eczema was established with 2，4-dinitrochlorobenzene alcohol solution，and the compound dexamethasone acetate cream was used as a positive control to evaluate the action and mechanism of EYO-CDs in the treatment of eczema.Results：EYO-CDs can reduce ear swelling in mice with chronic eczema，reduce interleukin-4（IL-4），interleukin-17（IL-17） and increase interferon-γ（INF-γ） in serum and tissues.The results of HE staining showed that pathological phenomena such as epidermal keratosis，edema，lymphocyte infiltration，dermal vasodilation and congestion in ear tissues were relieved to varying degrees after administration.The therapeutic effect has a certain dose-effect relationship with the administration concentration.Conclusion：EYO-CDs in distilled egg yolk has a therapeutic effect on chronic eczema in mice，mainly by inhibiting inflammatory factors and regulating immune factors，providing experimental evidence for clinical application.
Keywords Egg yolk oil; Carbon dots; EYO-CDs; Characterization; Eczema; IL-4; IL-17; INF-γ
中圖分类号：R284;R751文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.20.008
湿疹是一种常见的过敏性炎症性皮肤病，近年来发病率急剧增高，占皮肤科门诊病例的15%～30%[1]，发病人群广，可发于任何年龄性别，发病部位不一，甚至全身发病。其主要特点呈现为剧烈瘙痒，呈现多种形态的皮损，具有渗出倾向，急性与慢性反复发作，容易慢性化[2]。因其发病机制复杂，内在因素与外在因素相互作用是诱发本病的主要原因。治疗湿疹多用抗组胺药，激素类药物等，虽短期内可改善瘙痒和皮损症状，但是停药后容易复发，或产生耐药现象导致复发，长期使用易造成毛细血管扩张、皮肤萎缩、色素沉着等[3]。
湿疹在中医学属于“湿疮”“浸淫疮”等范畴。中医治疗湿疹具有悠久的历史，积累了丰富的临床经验，不仅能有效改善湿疹症状，而且降低复发率，治疗宜内外兼顾，然而中药外用散剂或霜剂、软膏等种类还不够丰富，因此开发使用方便、疗效显著、无不良反应、安全性高的中药外用制剂能够为临床提供一种新的选择。
蛋黄油为雉科动物家鸡鲜卵的卵黄提取物[4]，主要含有卵磷脂、脂肪酸、胆固醇、叶酸、胡萝卜素、钙、磷、铁等多种药用和营养成分[5]。现代临床实验证明蛋黄馏油具有保护和营养皮肤黏膜，促进创面愈合的作用，可治疗多种皮肤和黏膜疾病[6]。传统的蛋黄馏油是用干馏法制备而得，其工艺简单但是难以去除毒性致癌物苯并[α]芘和强烈的焦臭味，制约了临床应用，本课题组前期研究发现蛋黄馏油中含有纳米类成分[7]。为探索蛋黄馏油纳米类成分是否为治疗湿疹的物质基础。本实验用萃取法得到蛋黄馏油水溶性成分，并对萃取液中碳纳米类成分（EYO-CDs）进行表征，通过建立小鼠慢性湿疹模型，观察EYO-CDs对慢性湿疹小鼠的治疗作用，检测血清及皮肤组织中白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-17（IL-17）和γ干扰素（IFN-γ）的含量变化，为研究蛋黄馏油治疗湿疹的物质基础打开了新视野。 2.2 EYO-CDs对慢性湿疹小鼠右耳部厚度和重量的影响
与空白组比较，模型组小鼠右耳肿胀厚度及重量明显增加（P<0.01），提示小鼠湿疹实验模型造模成功。经过4次给药后，阳性药组与模型组比较，小鼠的右耳肿胀厚度及重量均有明显的降低，EYO-CDs各剂量组与模型组比较，小鼠的右耳肿胀厚度及重量也都有不同程度的降低，且存在一定的量效关系，浓度越高耳肿胀厚度及耳重量减轻的效果越好。与模型组比较，各组差异均有统计学意义（均P<0.05或P<0.01）。与阳性药组比较，EYO-CDs低剂量组耳重量大于阳性药组（P<0.05）。EYO-CDs低剂量组和中剂量组耳厚度大于阳性药组（P<0.05）。EYO-CDs高剂量组与阳性药组差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。
2.3 EYO-CDs对慢性湿疹小鼠耳组织病理学变化的影响
空白组小鼠耳部组织结构正常，表皮厚度正常，无水肿，无明显淋巴细胞浸润，血管形态正常。慢性湿疹模型组小鼠耳部表皮坏死，颗粒层增厚，棘层增厚，细胞内及细胞间水肿，真皮大量炎症细胞，淋巴细胞浸润，真皮血管扩张充血明显。阳性药物组小鼠表皮结构正常，略有角化，表皮及真皮水肿明显减轻，炎症细胞明显减少。EYO-CDs低剂量组表皮角化稍有减轻，水肿及炎症细胞浸润稍有减少，EYO-CDs中剂量组表皮角化减轻，结构清晰，炎症介质明显减少，稍有水肿。EYO-CDs高剂量组耳组织表皮结构正常，角化减轻明显，水肿、淋巴细胞浸润大量减少、增厚程度减少明显，血管形态正常。见图2。
2.4 各组小鼠血清中IL-4、IFN-γ含量比较
与空白组比较，模型组小鼠血清中IL-4含量明显升高，IFN-γ含量明显降低（P<0.01）。与模型组比较，阳性药组、EYO-CDs各剂量组小鼠血清中IL-4含量均有不同程度降低（P<0.01），与模型组比较，阳性药组、EYO-CDs中、高剂量组IFN-γ含量均有不同程度的提高（P<0.01），低剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。与各处理组比较，EYO-CDs高中低剂量组小鼠血清中IL-4含量高于阳性药组，IFN-γ含量均低于阳性药组（P<0.01），EYO-CDs组浓度越高，IL-4降低与IFN-γ升高程度越大。与阳性药组比较，EYO-CDs低中浓度IL-4、INF-γ差异均有统计学意义（均P<0.01），EYO-CDs高剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。
2.5 各组小鼠耳组织中IL-4、IL-17含量比较
与空白组比较，模型组小鼠耳组织中IL-4和IL-17含量明显升高（P<0.01）。与模型组比较，各给药组IL-4，IL-17均有不同程度降低，阳性药组IL-4，IL-17含量最低，EYO-CDs各剂量组随着药物浓度的升高，小鼠耳组織中IL-4和IL-17含量降低（P<0.01或P<0.05）。与阳性药组比较，EYO-CDs低中剂量组IL-4、IL-17差异有统计学意义（P<0.01），EYO-CDs高剂量组差异无统计学意义（P>0.05）。见表3。
3 讨论
蛋黄油也被称为“凤凰油”“鸡蛋油”“鸡卵油”“鸡子油”等[10]。蛋黄油最早出自北周姚僧垣的《集验方》，治汤火烧疮方，第一次确切的指出蛋黄油具有治烫伤，敛疮祛瘢痕的效果。此后便广泛地运用于治疗疮癣、烧烫伤、皮肤瘙痒等皮肤病。研究表明蛋黄馏油具有促进创面愈合，抗氧化，降血脂[11]，促进血管内皮生长因子表达等功效[12]。并且制作工艺简单，安全性高，不仅被运用于治疗胃溃疡，心悸，小儿百日咳等多种疾病[13]，更多用于治疗湿疹，烧烫伤，乳头皲裂等疾病。基于目前多集中于临床报道，药理药效研究不够深入，本课题组前期通过对蛋黄馏油萃取、透析，发现蛋黄馏油中含有碳点EYO-CDs。本实验通过对蛋黄馏油萃取液进行重新表征，分别利用低分辨和高分辨电镜观察其微观结构，紫外光谱及荧光光谱显示有荧光现象，验证了蛋黄馏油萃取液中EYO-CDs的存在。EYO-CDs粒径分布在1～2.8 nm之间，近似球形，晶格清晰，晶格间距为0.291 nm。荧光光谱最大激发波长为354 nm，最大发射波长为439 nm。前期研究结果：EYO-CDs粒径分布评价小于10 nm，近似球形，晶格清晰，晶格间距为0.267 nm。荧光光谱最大激发波长为366 nm，最大发射波长为450 nm。本研究中EYO-CDs与前期研究制备的EYO-CDs差异不大，重复性良好，说明本实验室对炭药的制备具有稳定性。蛋黄馏油中含有致癌物苯并（α）芘，且具有难闻的气味，制约了其制剂的发展和应用，本实验通过水萃取法可以有效去除苯并（α）芘及难闻的气味。
对于湿疹的发病机制尚未完全明确，普遍认为与炎症感染，遗传和环境因素有关[14-15]。目前研究发现，IL-4，IL-17等炎症介质的增加是慢性湿疹重要发病机制之一[16]。INF-γ等淋巴因子的分泌是减少变态反应，治疗湿疹的方法之一。Th1细胞分泌INF-γ可抑制Th2细胞所分泌的IL-4等炎症介质[17]。Th1占优势时预后良好，Th2占优势时预后不良，二者是相互制衡的关系[18]。IL-17在湿疹的病理生理学上发挥着至关重要的作用，在湿疹的急性期和复发期其明显升高，可能是湿疹的持续和加剧的因素之一[19]。本研究结果显示EYO-CDs能有效下调慢性湿疹小鼠血清及耳组织中IL-4水平，上调INF-γ水平，促进Th1增殖，抑制Th2的分泌，使Th1与Th2达到动态平衡，从而抑制炎症介质的表达，降低炎症反应。慢性湿疹模型小鼠耳组织中EYO-CDs组IL-17含量明显下降，说明EYO-CDs对湿疹模型小鼠IL-17的表达有明显的抑制作用。实验结果显示，小鼠耳组织中IL-4的含量明显高于血清中IL-4的含量，血清中IL-17含量低于试剂盒检测最低值，由此可以看出耳组织中IL-4与IL-17均高于血清中的含量，IL-4、IL-17在局部病变组织、血液中表达量不同[20]。HE染色结果显示，给药后耳组织表皮角化、水肿、淋巴细胞浸润、血管充血等病理现象均有不同程度缓解。治疗效果与给药浓度具有一定的量效关系。 综上所述，本研究对EYO-CDs进行表征，通过小鼠湿疹模型发现EYO-CDs是通过下调IL-4、IL-17，上调INF-γ，调节Th1与Th2的平衡，抑制炎症介质的表达，调节免疫因子，从而达到治疗慢性湿疹的作用，过萃取去除其中致癌物苯并[α]芘，增加了其安全性，并去除其难闻的气味。
参考文献
[1]娄方璐，刁庆春，刘毅，等.湿疹中医外治处方用药规律分析[J].陕西中医，2012，33（1）：97-100.
[2]北京醫学院，上海第一医学院.皮肤病学[M].北京：人民卫生出版社，1980：53.
[3]赵淑英，余嘉璇，袁启航.参柏洗液治疗皮炎湿疹的临床研究[J].中国新药杂志，2020，29（5）：547-549.
[4]湖南省食品药品监督管理局.湖南省中药材标准：2009年版[S].长沙：湖南科学技术出版社，2010：50-51.
[5]陈伊凡，唐宏刚，李欢欢，等.蛋黄油的提取及其氧化产物挥发性成分分析[J].核农学报，2020，34（11）：2499-2506.
[6]杨希良，赵青剑，景箫，等.醇提蛋黄油对胃粘膜损伤的辅助保护功能评价[J].食品安全质量检测学报，2019，10（22）：7502-7508.
[7]Zhao Y，Zhang Y，Liu X，et al.Novel carbon quantum dots from egg yolk oil and their haemostatic effects[J].Sci Rep，2017，7（1）：4452.
[8]李仪奎.中药药理实验方法学[M].2版.上海：科学技术出版社，2006：875-876.
[9]韩佳柳，林华，刘玉柱，等.苯并芘分子构型和特征光谱的研究[J].科技创新与应用，2016，6（17）：72.
[10]申海明，韩丽庭.蛋黄油在内科疾病治疗中应用[J].实用中医内科杂志，1998，12（2）：3-5.
[11]Wu P，Pan Y，Yan J，et al.Assessment of Egg Yolk Oil Extraction Methods of for ShiZhenKang Oil by Pharmacodynamic Index Evaluation[J].Molecules，2016，21（1）：E106.
[12]危红，李泽华，夏文维，等.蛋黄油在中医外科中的应用现状及展望[J].中国民族民间医药，2018，27（23）：76-79.
[13]包金燕.蛋黄油在内科疾病治疗中的应用[J].临床医药文献（连续型电子期刊），2016，3（56）：11204.
[14]廖理超，胡白，张思平，等.食物不耐受与慢性湿疹相关性的研究[J].皮肤性病诊疗学杂志，2018，25（3）：145-148.
[15]余志杰，邓婷，李劲松，等.蛇黄软膏对湿疹的抗过敏、止痒及抗炎作用研究[J].中国新药杂志，2020，29（16）：1868-1876.
[16]蔚志仁，石晶，王彩霞，等.参苓白术散加减治疗脾虚湿蕴型亚急性湿疹临床疗效及对炎症因子和外周血T淋巴细胞亚群的影响[J].中国实验方剂学杂志，2019，25（5）：63-67.
[17]李孜怡.金雀凉血解毒颗粒对大鼠湿疹模型免疫调节作用机制研究[D].哈尔滨：黑龙江中医药大学，2018.
[18]曹雪涛.医学免疫学[M].6版.北京：人民卫生出版社.2013：90-91，110-113，145-147.
[19]Souwer Y，Szegedi K，Kapsenberg ML，et al.IL-17 and IL-22 in atopic allergic disease[J].Curr Opin Immunol，2010，22（6）：821-826.
[20]李春联，王学民.DNCB诱发小鼠耳肿胀与组织内IL-4和IFN-γ的相关性[J].中国皮肤性病学杂志，2013，27（7）：667-669.
（2020-11-10收稿 责任编辑：杨觉雄）