背景 甲状腺相关眼病(TAO)患者的眼眶成纤维细胞(OFs)在眼部的增生性和炎症性反应中发挥重要作用,寻求抑制OFs增生的药物对TAO的防治具有重要意义.已有研究表明,秋水仙碱具有抗组织纤维化的作用,但其对TAO患者OFs的作用及其机制研究较少. 目的 研究秋水仙碱对体外培养的OFs增生的影响. 方法 将3例TAO患者行开眶减压术中获取的球后结缔组织用组织块培养法进行培养和鉴定,取3～8代的传代细胞进行体外实验.分别将1×10-5、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol/L秋水仙碱加入含质量分数10％小牛血清的RPMI 1640培养基中孵育OFs 24、48和72 h,用无秋水仙碱的RPMI 1640培养基孵育细胞作为对照,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测各组细胞450 nm处的吸光度(A450)值,评估OFs的生长情况和各浓度组秋水仙碱对OFs的抑制率.此外,分别在培养基中加入1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol/L秋水仙碱作用48 h,采用流式细胞术及应用MCYCLE软件进行分析,用百分率记录亚二倍体细胞数据及细胞周期各时期数据,检测各浓度药物组及无药物培养基组OFs的凋亡率和细胞周期的分布；采用免疫组织化学染色法测定转化生长因子-β(TGF-β)在OFs中的表达,以评价不同浓度秋水仙碱对OFs分泌TGF-β功能的影响.结果 培养和传代的OFs呈梭形,波形蛋白免疫化学染色为阳性反应.1×10-4、1×10-5、1 ×10-6、1×10-7、1×10-8mol/L秋水仙碱作用24、48和72 h,随着秋水仙碱浓度的增加,OFs的增生值(A450)逐渐下降,差异有统计学意义(F浓度=62.004,P＜0.05)；此外,随着秋水仙碱作用时间的增加,A450值逐渐下降,差异有统计学意义(F时间=459.582,P＜0.05)；随着秋水仙碱浓度的增加,其对OFs生长的抑制率逐渐升高.对照组、1×10-6、1×10-5、1×10-4 mol/L秋水仙碱组OFs凋亡率分别为(1.73±0.15)％、(21.04±4.56)％、(31.84±6.21)％和(35.32±5.56)％,4个组间差异有统计学意义(F=83.905,P＜0.05),各组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05)；随着秋水仙碱浓度的增加,G2+M期细胞百分数逐渐下降,差异有统计学意义(F=20.443,P＜0.05).免疫组织化学法检测发现,在融合状态前的OFs可以分泌TGF-β,阳性率为(97.60±2.09)％,而1×10-4 mol/L秋水仙碱作用后OFs密度明显减低,部分OFs阳性率为(44.43±3.96)％,差异有统计学意义(t=65.330,P＜0.05). 结论 秋水仙碱可能通过减少OFs分泌TGF-β抑制TAO患者OFs的增生并诱导OFs的凋亡,其作用呈时间和剂量依赖性。