家蝇攻击素(Attacin)基因的克隆与表达

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通过同源克隆策略并结合cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆到了编码家蝇攻击素 (Attacin)基因的全长cDNA序列 (GenBank登陆号 :AY4 6 0 10 6 ) ,并对相应的氨基酸序列进行了序列比对 ,对系统关系等进行了生物信息学分析。家蝇Attacin的cDNA全长 778bp ,其中包括 6 2 7bp的开放式读码框 (ORF) ,4 4bp的 5′末端非编码区 (5′UTR)和 10 7bp的 3′末端非编码区 (3′UTR) ,相应的蛋白产物含 2 0 8个氨基酸 ,与其他双翅目昆虫的Attacin具有很高的相似性 ,约 5 0 %~ 70 %。以邻接法 (Neighbor Joining ,NJ)所构建的系统关系表明 ,家蝇的Attacin与其他双翅目昆虫的Attacin起源于共同的祖先。应用半定量RT PCR的方法 ,研究家蝇幼虫在受到外源刺激后Attacin基因的表达 ,结果表明 ,在家蝇幼虫体内Attacin基因呈诱导型表达 ,表达水平随诱导时间和诱导源的不同而变化
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