三分三细胞浸没(发酵)培养及培养细胞中莨菪碱和东莨菪碱的鉴定

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三分三浸没培养细胞的生长速率是1.5克千重/升/天,为三分三细胞悬浮培养的3倍,为三分三固体静态培养的10倍多。浸没培养细胞中莨菪碱(0.203毫克/克干重)和东莨菪碱(0.178毫克/克干重)含量仅稍高于悬浮培养和固体培养物。但在培养12天之后的浸没培养中补充以苯丙氨酸(5毫克分子/升)和激动素(0.1毫克/升)时,不仅培养细胞的生长速率有所增加而且培养细胞中莨菪碱含量可高达0.217毫克/克干重和东莨菪碱含量高达0.412毫克/克干重。两种生物碱的含量分别为未补充这些化合物的对照的1.1和2.3倍。三分三浸没培养的较适收获期是在浸没培养的第14天。从培养细胞中分离到莨菪碱和东莨菪碱单体。经纯化和重结晶之后被薄层层析、熔点和紫外、红外、核磁共振等光谱鉴定,证明了它们确系茛菪碱和东莨菪碱结晶。研究结果表明可用三分三细胞发酵培养法生产莨菪碱和东茛菪碱。
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