目的：研究比较三种经典饲养层体系使用的成纤维细胞中 Wnt 基因的表达，及其对共培养的人胚胎干细胞的影响。方法：PCR 验证19种 Wnt 基因在三种不同来源饲养层细胞中的表达情况，qPCR 验证各组共培养人胚胎干细胞的 Wnt／β-Catenin 信号通路相关基因表达水平，流式检测其在不同密度饲养层条件下的增殖分化情况。结果：在全部19种 Wnt 基因（Wnt1，Wnt2，Wnt2b，Wnt3，Wnt3a，Wnt4，Wnt5a，Wnt5b，Wnt6，Wnt7a， Wnt7b，Wnt8a，Wnt8b，Wnt9a，Wnt9b，Wnt10a，Wnt10b，Wnt11，Wnt16）的表达检测中，昆明白小鼠来源饲养层细胞表达其中的16种，ICR 小鼠来源饲养层细胞表达其中的10种，人成纤维细胞来源饲养层细胞表达其中的10种；增加饲养层细胞密度能够不同程度活化 Wnt／β-Catenin 信号通路下游基因的表达，并激活人胚胎干细胞中的负反馈机制；高密度小鼠饲养层条件促进人胚胎干细胞的分化，高密度人饲养层条件促进人胚胎干细胞的增殖和分化。结论：不同经典饲养层体系提供的 Wnt 环境不同，其培养的人胚胎干细胞状态也有差异。