【摘 要】
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以伪狂犬病毒Ea株BamH I 5′片段为模板,PCR扩增出约0.9 kbgK基因完整编码区片段,将该基因克隆到pBluescriptIISK＋中,构建重组载体pSKgK。进一步将该片段插入真核表达载体pEGF
【机 构】
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河南农业科学院畜牧兽医研究所,华中农业大学农业微生物国家重点实验室
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以伪狂犬病毒Ea株BamH I 5′片段为模板,PCR扩增出约0.9 kbgK基因完整编码区片段,将该基因克隆到pBluescriptIISK＋中,构建重组载体pSKgK。进一步将该片段插入真核表达载体pEGFP-C1的增强绿荧光蛋白EGFP下游,构建真核表达载体pEGFPgK,脂质体法转染BHK-21细胞,G418筛选至正常细胞完全死亡,在倒置荧光显微镜下观察,pEG-FPgK转染的细胞在细胞膜和细胞浆中发出很强的荧光,而正常细胞不发荧光。证明gK基因在BHK-21细胞上获得了表达,表达在细胞膜和细胞浆
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