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目的构建人Tie2基因真核表达载体,并建立稳定过表达rrie2基因的SKOV3细胞系。方法采用RT—PCR方法从人肝癌细胞BEL-7402细胞系中扩增Tie2基因编码区(cDNA),将产物克隆至pEGFP—N1真核表达载体,构建重组质粒pEGFP—N1.Tie2并测序鉴定。用构建成功的pEGFP—N1.Tie2真核表达载体转染人卵巢癌细胞SKOV3,经G418稳定筛选,分离单克隆,最后获得Tie2稳定表达的SKOV3细胞系,并用实时荧光定量PCR、WesternBlot方法鉴定构建结果。结果成功构建pEG