香菇多糖对鲤鱼(Cyprinus carpio)离体培养免疫细胞的活性调节作用

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jason008_xu
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采用Percoll密度离心等技术,对鲤鱼(Cyprinus carpip)的头肾巨噬细胞和外周血白细胞进行分离纯化,并离体培养。体外暴露不同浓度的香菇多糖后,分别采用MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide)法测定它们对鲤鱼外周血白细胞增殖的影响;NBT(nitroblue tetrazolium)还原法和Griess试剂显色法测定对头肾巨噬细胞的呼吸爆发的影响;实时定量PCR法测定头肾巨噬细胞细胞因子IL-1β诱导表达的影响。结果显示,香菇多糖1、10和100μg/mL作用头肾巨噬细胞24 h后能显著地诱导巨噬细胞的氧爆发活性;作用头肾巨噬细胞96 h后,其低浓度对巨噬细胞生成NO无显著影响,当作用浓度为1 000μg/mL表现出显著的抑制作用;浓度为100和1000μg/mL的香菇多糖作用外周血白细胞24 h后显著地促进鲤鱼外周血白细胞的增殖,且在作用巨噬细胞24 h后100μg/mL能显著增强IL-1β的体外诱导表达。香菇多糖对离体培养鲤鱼免疫细胞有明显活性作用,对鲤鱼非特异性免疫和特异性免疫具有促进作用,是一种有潜力的鱼用免疫增强剂。
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