在人肝细胞癌(HCC)标本中检测癌和癌旁组织中长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录体1(NEAT1)的表达差异，应用化学合成小干扰RNA(siRNA)抑制两组人肝癌细胞株(HepG2和SMMC-7721)NEAT1的转录，观察NEAT1转录降低后对HCC细胞的表达谱、侵袭和增殖功能的影响。
方法利用Trizol-氯仿提取HCC组织标本和癌旁组织(n＝12)，细胞株(HepG2、SMMC-772、HCC-LM3)中的总RNA，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组NEAT1表达差异[甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)作为内参]，使用转染试剂Lipofectamine 2000和siRNA NEAT1(终质量浓度100 nmol/L)对HepG2和SMMC-7721细胞进行NEAT1敲低，RT-qPCR检测NEAT1敲低效果，并对NEAT1敲低组(NEAT1表达量<对照组40%)和对照组细胞(n＝2)进行表达谱测序，检测NEAT1敲低后对HCC细胞各肿瘤相关基因表达的影响，对NEAT1敲低组和对照组细胞进行羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记(终质量浓度5 μmol/L)的细胞(2×105个/孔)增殖检测、细胞计数试剂盒(CCK-8)进行细胞增殖检测(10 μl/2 000个细胞)、Transwell细胞侵袭移动能力检测来探究NEAT1对HCC细胞(2×105个/孔)增殖和侵袭功能的影响。
结果NEAT1在HCC细胞和癌组织中表达量高于癌旁组织(P<0.01)，敲低HCC细胞株NEAT1表达导致很多参与肿瘤发生、发展通路的基因表达量改变(229个基因表达上调，148个基因表达下调，表达量改变超过2倍且P<0.05)，敲低HCC细胞株NEAT1表达降低了HCC细胞体外增殖(P<0.01)、侵袭(P<0.01)的能力。
结论lncRNA NEAT1在人肝细胞癌的发生、发展中发挥了原癌基因的作用。